[发明专利]一种雷公藤甲素-羧化壳聚糖偶联药物的制备方法及应用

摘要

本发明之目的是提供一种雷公藤甲素‑羧化壳聚糖偶联药物的制备方法及应用，包括以下步骤：（1）、中间体羧基化雷公藤甲素（TP‑L）的合成：（2）、雷公藤甲素‑羧化壳聚糖偶联药物（TP‑L‑CChit）合成；本发明方法制备的雷公藤甲素‑羧化壳聚糖偶联药物（TP‑L‑CChit）作为前体药物在制备治疗类风湿关节炎病、肿瘤和阿尔茨海默病药物中的应用；本发明方法简单，易生产制备，产率高，原料丰富易得，本发明产品水溶性好、生物半衰期长、利用度高、无毒副作用，疗效好，是制备治疗类风湿关节炎病、肿瘤和阿尔茨海默病药物上的创新，经济和社会效益显著。

主权项

1.一种雷公藤甲素‑羧化壳聚糖偶联药物的制备方法，其特征是：该偶联药物化学结构式为：其中，X=0.05‑0.1，y=0.1‑0.3，z=0.2‑0.8，n=0‑3，羧化壳聚糖（CChit）分子量为10‑100kDa；其制备方法是：包括以下步骤：（1）、中间体羧基化雷公藤甲素（TP‑L）的合成：将雷公藤甲素溶于吡啶中，再加入酸酐和4‑二甲氨基吡啶（DMAP），雷公藤甲素与酸酐的摩尔比为1:1‑4，在氮气保护下，0‑25℃下，搅拌反应12‑24h，加入二氯甲烷，再分别用饱和硫酸铜溶液和水洗涤1‑3次，得有机相，有机相用无水硫酸钠干燥，再用体积比为CH2Cl2:CH3OH=20‑15:1的混合液做流动相的硅胶层析柱纯化，再经二氯甲烷‑丙酮‑乙醚重结晶，得羧基功能化的中间体羧基化雷公藤甲素（TP‑L）；雷公藤甲素‑羧化壳聚糖偶联药物（TP‑L‑CChit）合成：将步骤（1）中得到的中间体羧基化雷公藤甲素（TP‑L）溶解在无水二甲基亚矾（DMSO）溶液中，再加入N‑羟基琥珀酰亚胺（NHS）和1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐（EDCI），羧基化雷公藤甲素（TP‑L）、N‑羟基琥珀酰亚胺（NHS）和1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐（EDCI）的摩尔比为1：（1.5‑3）：（3‑6），0‑25℃下避光搅拌反应4‑12h，得第一反应液，将羧化壳聚糖溶于硼酸盐缓冲液和无水二甲基亚矾（DMSO）的混合溶液中，羧化壳聚糖与羧基化雷公藤甲素（TP‑L）的摩尔比为10‑100:1，硼酸盐缓冲液与无水二甲基亚矾（DMSO）的体积比为1‑3:1,0‑25℃下，搅拌反应12‑24h，得第二反应液，将第二反应液加入第一反应液中，搅拌24h，得第三反应液，将第三反应液移入截留分子量为3500Da的透析袋中，用双蒸水透析3次，每次16h，冻干，即得雷公藤甲素‑羧化壳聚糖偶联药物（TP‑L‑CChit）；所述的酸酐为丙二酸酐、丁二酸酐（又称琥珀酸酐）、戊二酸酐、己二酸酐中的一种；所述羧化壳聚糖的脱乙酰度为92%，羧甲基度为70%。