[发明专利]基于发酵液复合盐析的吡咯喹啉醌二钠盐分离纯化方法

摘要

本发明公开了一种基于发酵原料液的吡咯喹啉醌二钠盐的分离纯化方法，包括如下步骤：(1)一次过滤；(2)二次过滤；(3)吡咯喹啉醌的提取；(4)一次盐析；(5)活性炭脱色；(6)二次盐析；(7)结晶。本发明所述的分离纯化方法工艺操作简单，成本低廉，能有效缩短产品纯化周期，而且产品回收率高，产品纯度可高达到99.5％。

主权项

1.一种基于发酵原料液的吡咯喹啉醌二钠盐分离纯化方法，其特征在于，包括如下具体步骤：(1)一次过滤：吡咯喹啉醌发酵液通过膜分离技术进行第一次过滤，得到吡咯喹啉醌一次滤液；(2)二次过滤：取上步得到的一次滤液，用酸调pH至4.0‑4.3除杂，搅拌1‑1.5h后过滤，其中，滤膜预涂一层介孔二氧化硅，过滤得到除杂滤液；(3)吡咯喹啉醌的提取：向上步得到的除杂滤液中滴加浓硫酸，使pH至2.4‑3.0，加入聚乙烯醇磁性微球进行吸附，吸附反应1‑3h后吡咯喹啉醌接枝于磁性微球上，用磁场分离磁性微球；将磁性微球分散在水中，调pH至10‑11发生水解反应，1‑2h后用磁场分离磁性微球，得到吡咯喹啉醌溶液；(4)一次盐析：往吡咯喹啉醌溶液中加入无机钠盐或有机钠盐至盐浓度达到1.0‑1.5mol/L，用硫酸调pH至2.8‑3.8，使之成二钠盐形态析出，搅拌2‑3h充分盐析后过滤，过滤结束用pH＝3.0‑3.5的酸水洗涤滤饼；(5)活性炭脱色：将一次盐析粗品用纯化水溶解完全，加入溶液重量1‑5wt％的活性碳脱色1‑1.5h后过滤，得到脱色滤液；(6)二次盐析：往脱色滤液中加入无机钠盐或有机钠盐至盐浓度达到1.0‑1.5mol/L，用酸调pH至5.0‑6.0，使之成三钠盐形态析出，搅拌2‑3h充分盐析后过滤，过滤结束用pH＝5.5‑6.0的酸水洗涤滤饼；(7)结晶：将二次盐析物用40‑60％醇溶液溶解，用硫酸调pH至3.0‑4.0，搅拌降温结晶8‑12h后过滤，得到吡咯喹啉醌二钠盐湿品；其中，所述的聚乙烯醇磁性微球通过如下步骤制备得到：(1)在50‑60℃下，将一定量的FeCl₂溶液和FeCl₃溶液混合加入到三颈瓶中，在分散机搅拌的同时，滴加一定量的NaOH溶液，并升温到80‑90℃，搅拌，待反应完成后用磁场分离沉淀，蒸馏水反复洗涤至上清液中性，烘干得到黑色粉末状的Fe₃O₄磁流体；(2)用蒸馏水将PVA充分溶胀，在80‑90℃下搅拌制成9‑10％的PVA水溶液，将适量的Fe₃O₄磁流体倒入PVA溶液中，搅拌混匀，分散后倒入分散介质中，在一定温度和搅拌条件下搅拌，再依次加入一定量的戊二醛、浓盐酸和海藻酸钠，反应完全后用磁场分离沉淀，依次用酒精和蒸馏水反复洗涤，从而得到所述聚乙烯醇磁性微球。