[发明专利]一种抗炭疽病红绿茶茶树的培育方法

摘要

本发明公开了一种抗炭疽病红绿茶茶树的培育方法，该培育方法包括以下步骤：1、选取茶树育种主干亲本和炭疽病抗源亲本；2、育种主干亲本和炭疽病抗源亲本杂交育种；3、对育种主干亲本和炭疽病抗源亲本进行粗毒素耐性浓度的测试；4、杂交F1代花药培养，粗毒素筛选；5、花培幼苗继代生根；6、花培苗炼苗移栽；7、花培苗田间定植后进一步筛选。本发明在茶树杂交育种的基础上对杂交F1代开展花药培养，并利用炭疽病粗毒素进行早期筛选，实现了茶树抗炭疽病定向培育，极大地缩短了茶树抗病育种周期，加速了抗病育种进程，对降低农药使用、保护环境、提升茶叶品质、推进茶树产业的健康发展都具有重要意义。

主权项

1.一种抗炭疽病红绿茶茶树的培育方法，其特征在于，该培育方法包括以下步骤：1、选取茶树育种主干亲本和炭疽病抗源亲本选取经济性状优良但炭疽病抗性不高的红绿茶茶树品种作为育种主干亲本；根据已有的茶树种质资源炭疽病抗性评价，筛选出高抗炭疽病且抗性稳定的茶树品种（系）作为炭疽病抗源亲本；2、育种主干亲本和炭疽病抗源亲本杂交育种在育种主干亲本和炭疽病抗源亲本的开花期，采用常规人工授粉的方法将二者进行杂交，结实后收获杂交F1代的种子；将杂交F1代正季播种育苗；3、对育种主干亲本和炭疽病抗源亲本进行粗毒素耐性浓度的测试育种主干亲本和炭疽病抗源亲本进入现蕾期后，分别对二者进行花药培养诱导出愈伤组织，当愈伤组织长到1~1.5mm时，将其转接到添加了梯度浓度茶树炭疽病粗毒素的分化培养基上进行分化培养，当育种主干亲本和炭疽病抗源亲本的愈伤组织分化率在1.3%~1.9%之间时，统计其分化培养基对应添加的粗毒素浓度，并取两者的平均值作为杂交F1代花药培养粗毒素筛选压；4、杂交F1代花药培养，粗毒素筛选杂交F1代生长发育进入现蕾期后，对其进行花药培养诱导出愈伤组织，当愈伤组织长到1~1.5mm时转接到添加了上述花药培养粗毒素筛选压的分化培养基上进行分化培养，获得茶树花培幼苗；5、花培幼苗继代生根待上述茶树花培幼苗长至3~5cm时，转接到生根培养基中，在温度23~27℃、光照强度2500~3000Lux、每天光照15~17h的条件下培养25‑30d，获得根系生长旺盛的完整茶树花培苗；6、花培苗炼苗移栽待茶树花培苗长出3~4片真叶时，打开瓶口先在培养室内炼苗2~4天，再转移到温度为15~30℃、相对湿度为80~90%的温室中，利用自然光炼苗7~10天，然后将花培苗移栽到栽培基质中，温室常规栽培管理；7、花培苗田间定植后进一步筛选将温室栽培4个月左右的花培苗定植到田间，进行常规田间管理，在花培苗生长发育进入成年期的时间里，进一步筛选出炭疽病抗性得到改良并且经济性状优良的红绿茶茶树新品系；所述步骤3和步骤4中花药培养诱导愈伤组织的过程如下：1）花蕾采集与预处理：根据不同时期茶树花蕾的形态特征，在晴天上午采集大部分花粉发育时期处于单核中晚期的花蕾，将花蕾用洗涤剂清洗后再用自来水冲洗干净，然后将花蕾放入40g/L的甘露醇溶液中，4℃低温预处理3~5d；2）花药消毒与接种：将预处理后的花蕾转入超净工作台中进行无菌操作，先将花蕾放入75%乙醇中浸泡60s，用灭菌水冲洗2~3次，再将花蕾放入0.1%氯化汞溶液中浸泡15min，边浸泡边轻轻震荡，再用灭菌水冲洗冲洗5~6次，然后从花蕾中剥离出花药，切去花丝后接种到半固体诱导培养基上进行诱导培养，35~42天后获得花药愈伤组织；所述半固体诱导培养基的配方为：MS基本培养基+蔗糖25~33g/L+麦芽糖44~50g/L+植物凝胶2~4g/L+硫酸镨0.2~0.3mg/L+亚硫酸氢钠2.2~2.6mg/L+三十烷醇 0.15~0.20mg/L+1.2%多硝酚钾水剂 1.8~2.2mL/L+6‑BA 1.0~1.2mg/L+羧甲基纤维素15~22g/L+陈皮素9~15mg/L+大豆异黄酮5.3~6.3mg/L+半胱氨酸盐酸盐22~28mg/L+鼠尾草提取物40~50ml/L，pH调节为5.6~6.0；所述步骤3和步骤4中分化培养基的配方为：KNO3 2560~2680mg/L，KH2PO4 330~350mg/L，(NH4)2SO4 502~514mg/L，MgSO4·7H2O 140~180mg/L，CaCl2·2H2O 410~460mg/L，MnSO4·4H2O 8.7~9.5mg/L，蛋氨酸锌 6.6~7.2mg/L，H3BO3 5.8~6.4mg/L，KI 0.6~0.8mg/L，CuSO4·5H2O 0.023~0.027mg/L，CoCl2·6H2O 0.023~0.027mg/L，Na2MoO4·2H2O 0.20~0.30mg/L，FeSO4·7H2O 27~28mg/L，Na2‑EDTA 36~37mg/L，硝普钠0.24~0.28mg/L，肌醇65~75mg/L，酵母氨基酸5.8~6.5mg/L，维生素B6 0.5~0.6mg/L，维生素B1 0.5~0.6mg/L，维生素K 0.3~0.5mg/L，姜黄素1.1~1.5mg/L，萘乙酸钠1.8~2.2mg/L，康多酚0.4~0.6mg/L，柠檬酸钛5.5~6.1mg/L，海藻糖6.1~6.9g/L，茶多酚36~44mg/L，麦芽糖31~35g/L，植物凝胶5~7g/L，pH值为5.6~6.0。