[发明专利]一种模拟肺癌发生机制的细胞模型建立方法及应用在审
| 申请号： | 201811237174.4 | 申请日： | 2018-10-23 |
| 公开（公告）号： | CN109294990A | 公开（公告）日： | 2019-02-01 |
| 发明（设计）人： | 单斌;刘子杰;李轶勋;马丽菊;段勇 | 申请（专利权）人： | 昆明医科大学第一附属医院 |
| 主分类号： | C12N5/0786 | 分类号： | C12N5/0786;C12N5/071;C12Q1/02;G01N33/68;G01N33/574 |
| 代理公司： | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人： | 汤东凤 |
| 地址： | 650032 云*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | 本发明涉及细胞医学领域，具体涉及一种模拟肺癌发生机制的细胞模型建立方法及应用。本发明提供一种模拟肺癌发生机制的细胞模型建立方法，所述方法为：将BPDE和球形SNPs作为诱导剂，诱导BEAS‑2B细胞和THP‑9细胞共培养体系中的BEAS‑2B细胞发生恶性转化，所建立的细胞模型高度模拟与宣威肺癌发病机制相同的肺癌诱导发生过程，在研究肺癌的发生和筛选预防治疗肺癌药物中有应用价值。 | ||
| 搜索关键词： | 细胞模型 肺癌发生 肺癌 诱导 应用 细胞共培养 恶性转化 发病机制 肺癌药物 细胞发生 细胞医学 诱导剂 筛选 细胞 治疗 预防 研究 | ||
【主权项】：
1.一种模拟肺癌发生机制的细胞模型建立方法，其特征为：所述方法包括如下步骤：①细胞培养BEAS‑2B细胞所用细胞培养基为添加10％FBS的LHC‑9培养液，细胞贴壁生长至底面90％时用0.25％的胰蛋白酶进行消化传代；THP‑1细胞所用培养基为添加10％FBS的LHC‑9培养液，细胞悬浮生长，每2‑3天更换一次培养基，将培养瓶直立静置半小时左右，待大部分细胞沉至瓶底，吸出1/2‑2/3的旧培养基，加入新的LHC‑9培养液继续培养；②共培养体系构建将消化好的BEAS‑2B细胞和THP‑9细胞混合于新的培养瓶中，细胞浓度比为：BEAS‑2B：THP‑9＝5:1，培养基为添加10％FBS的LHC‑9培养液；③细胞模型的建立在上述步骤②共培养体系中加入BPDE和球形SNPs，所述BPDE的终浓度为200‑1200nmol/ml；所述球形SNPs的终浓度为1.5625‑25μg/ml，混匀后，将该共培养体系置于37℃，5％CO2细胞培养箱中培养18‑36小时，则模拟肺癌发生机制的细胞模型建立完成。
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