[发明专利]一种羊水间充质干细胞分化为神经干细胞的方法在审
| 申请号： | 201811148883.5 | 申请日： | 2018-09-29 |
| 公开（公告）号： | CN109385399A | 公开（公告）日： | 2019-02-26 |
| 发明（设计）人： | 朱建斌;江嘉豪;何美弟;陈炽峰;康斯敏;陈碧莹;刘诗华;王进辉 | 申请（专利权）人： | 广东唯泰生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0797 | 分类号： | C12N5/0797;C12N5/0775 |
| 代理公司： | 广州新诺专利商标事务所有限公司 44100 | 代理人： | 刘婉;许英伟 |
| 地址： | 528200 广东省佛山市南海*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种羊水间充质干细胞分化为神经干细胞的方法，其包括以下步骤：离心分离羊水组织中的干细胞，得到羊水间充质干细胞；用羊水间充质干细胞无血清增殖培养基培养羊水间充质干细胞；传代至P3代羊水间充质干细胞；用胰蛋白酶消化P3代羊水间充质干细胞，得到单细胞悬液，培养过夜；去除羊水间充质干细胞无血清增殖培养基，然后清洗，再加入第一诱导培养基诱导培养；去除第一诱导培养基，然后用胰蛋白酶消化得到单细胞悬液，使用第二诱导培养基接种培养，得到神经干细胞形成的细胞球。本发明使用了多种特异性细胞因子，通过两步法将羊水间充质干细胞诱导得到神经干细胞，所得到的神经干细胞具备神经干细胞的成球生长特性。 | ||
| 搜索关键词： | 羊水 间充质干细胞 神经干细胞 诱导培养基 胰蛋白酶消化 单细胞悬液 增殖培养基 无血清 去除 特异性细胞因子 传代 分化 接种培养 生长特性 诱导培养 干细胞 两步法 细胞球 成球 清洗 诱导 | ||
【主权项】：
1.一种羊水间充质干细胞分化为神经干细胞的方法，其特征在于包括以下步骤：(1)离心分离羊水组织中的干细胞，去除上清液，清洗沉淀，再次离心去上清，得到羊水间充质干细胞；(2)用羊水间充质干细胞无血清增殖培养基培养所述羊水间充质干细胞；(3)将所述羊水间充质干细胞原代细胞传代至P3代羊水间充质干细胞；(4)用胰蛋白酶消化所述P3代羊水间充质干细胞，得到单细胞悬液，用所述羊水间充质干细胞无血清增殖培养基接种培养过夜；(5)去除所述羊水间充质干细胞无血清增殖培养基，然后清洗，再加入第一诱导培养基诱导培养；(6)去除所述第一诱导培养基，然后清洗，用胰蛋白酶消化得到单细胞悬液，使用不同于所述第一诱导培养基的第二诱导培养基接种培养，得到神经干细胞形成的细胞球。
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