[发明专利]一种脐带血再生粒子及其制备方法与应用在审
申请号: | 201811147869.3 | 申请日: | 2018-09-29 |
公开(公告)号: | CN109777772A | 公开(公告)日: | 2019-05-21 |
发明(设计)人: | 孔五一 | 申请(专利权)人: | 孔五一 |
主分类号: | C12N5/078 | 分类号: | C12N5/078;A61K35/51;A61K9/16;A61P13/12 |
代理公司: | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人: | 汤东凤 |
地址: | 北京市海淀区*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了一种脐带血再生粒子及其制备方法与应用,制备方法步骤是:S1、取脐带血进行离心分层;S2、取一级下层沉淀加入无菌缓冲液再进行离心分层;S3、取二级下层沉淀,加入无菌红细胞裂解液进行离心分层;S4、取三级下层沉淀,加入无菌缓冲液进行离心分层;S5、分别取一级上层溶液、二级上层溶液、四级上层溶液,进行离心分层,离心分层后,收集所有沉淀,加入pH值7.0‑7.4、含有血清的培养基,置于37℃、5%CO2的培养箱中进行培养,每2‑3天更换培养基一次;S6、经培养处理,检测合格后,收集所有培养成分,离心收集脐带血再生粒子。本发明的脐带血再生粒子可以在组织细胞再生与修复中进行应用。 | ||
搜索关键词: | 离心分层 脐带血 再生粒子 沉淀 无菌 下层 培养基 上层 缓冲液 制备 应用 红细胞裂解液 制备方法步骤 离心收集 组织细胞 培养箱 血清 修复 再生 检测 | ||
【主权项】:
1.一种脐带血再生粒子的制备方法,其特征在于:包含如下步骤:S1、取脐带血进行离心分层,离心分层后分为一级上层溶液和一级下层沉淀;S2、取一级下层沉淀,加入无菌缓冲液,进行离心分层,离心分层后分为二级上层溶液和二级下层沉淀,该无菌缓冲液可以是现有技术已知的任何一种;S3、取二级下层沉淀,加入无菌红细胞裂解液,置于水平摇床摇动,待完全裂解后进行离心分层,离心分层后分为三级上层溶液和三级下层沉淀,三级上层溶液直接弃掉,该无菌红细胞裂解液可以是现有技术已知的任何一种;S4、取三级下层沉淀,加入无菌缓冲液,剧烈晃动,之后进行离心分层,离心分层后分为四级上层溶液和四级下层沉淀,四级下层沉淀直接弃掉,该无菌缓冲液可以是现有技术已知的任何一种;S5、分别取一级上层溶液、二级上层溶液、四级上层溶液,进行离心分层,离心分层后,收集所有沉淀,加入pH值7.0‑7.4、含有血清的培养基,置于37℃、5%CO2的培养箱中进行培养,每2‑3天更换培养基一次;S6、经培养处理,检测合格后,收集所有培养成分,离心收集脐带血再生粒子,所述经培养处理涵盖多种有效处理方式如洗涤/培养、过滤/培养。
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