[发明专利]从甲醛固定的微量样品中提取并扩增DNA片段的方法有效
| 申请号： | 201811108069.0 | 申请日： | 2018-09-21 |
| 公开（公告）号： | CN109234269B | 公开（公告）日： | 2021-10-12 |
| 发明（设计）人： | 张根;张霞;徐锦前 | 申请（专利权）人： | 深圳金普迈生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12Q1/6806 |
| 代理公司： | 深圳市科吉华烽知识产权事务所(普通合伙) 44248 | 代理人： | 赵雪佳 |
| 地址： | 518000 广东省深圳市宝安区*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明提出了从甲醛固定的微量样品中提取并扩增DNA片段的方法，通过先去除甲醛，利用蛋白酶K和胰蛋白酶两种酶充分消解样品提取DNA，再通过PCR技术修复断裂的DNA片段，最终再以此为PCR模版扩增目的基因片段，最终建立了一个适用于甲醛固定后的微量样品，步骤清晰，DNA提取效率高，质量好的提取并扩增DNA的方法。与现有技术相比，本发明的有益效果是可在微量样品中较为有效地提取DNA，再利用PCR扩增目的片段，从而达到获取我们想要的目的基因的效果。 | ||
| 搜索关键词： | 甲醛 固定 微量 样品 提取 扩增 dna 片段 方法 | ||
【主权项】：
1.从甲醛固定的微量样品中提取并扩增DNA片段的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1，去除甲醛固定的微量样品中的游离甲醛；S2，加入过量蛋白酶K、胰蛋白酶和缓冲液对甲醛固定的微量样品进行消化；S3，抽提甲醛固定的微量样品中的蛋白、脂肪等杂质；S4，加入糖原和异丙醇，使微量DNA与糖原颗粒结合后沉淀，离心获得DNA沉淀；S5，洗涤DNA沉淀，并使其溶于纯水中；S6，使用Taq酶对DNA进行断裂修复，获得更高质量的DNA;S7，以此DNA为模版，扩增目的基因片段。
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