[发明专利]稳定表达细胞因子的间充质干细胞条件培养液及制备方法和用途有效
申请号: | 201811077621.4 | 申请日: | 2018-09-15 |
公开(公告)号: | CN109106727B | 公开(公告)日: | 2021-11-02 |
发明(设计)人: | 韩之波;贾红红;赵钦军 | 申请(专利权)人: | 天津昂赛细胞基因工程有限公司 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775 |
代理公司: | 天津市北洋有限责任专利代理事务所 12201 | 代理人: | 曹玉平 |
地址: | 300457 天津市滨海新区经*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明公开了稳定表达细胞因子的间充质干细胞条件培养液及制备方法和用途,其方法为:(1)用完全培养基对分离得到的间充质干细胞进行培养至P3‑P5代:(2)取获得的同一代次的同种异体来源的4‑8株间充质干细胞分别复苏,取4‑8株等细胞数量进行混合,在完全培养基中培养,待融合度为60%‑90%;换无血清无酚红DMEM/F12培养基,饥饿培养,收集上清,并得到培养后的细胞;上清过滤,获得稳定表达细胞因子的间充质干细胞培养液。本发明培养液中未添加血清,且整个制备过程中未添加抗生素和激素类产品,从而保证了最终得到的细胞条件培养液的安全性,防止因异种蛋白过敏或抗生素以及激素过敏而引发的安全性问题。 | ||
搜索关键词: | 稳定 表达 细胞因子 间充质 干细胞 条件 培养液 制备 方法 用途 | ||
【主权项】:
1.稳定表达细胞因子的间充质干细胞条件培养液的制备方法,其特征是包括如下步骤:(1)用完全培养基对分离得到的间充质干细胞进行培养至P3‑P5代:(2)取步骤(1)获得的同一代次的同种异体来源的4‑8株间充质干细胞分别复苏,取4‑8株等细胞数量进行混合,在完全培养基中培养,待融合度为60%‑90%;换无血清无酚红DMEM/F12培养基,饥饿培养12‑24小时,收集上清,并得到培养后的细胞;上清用0.22μm的无菌微孔滤膜进行过滤,获得稳定表达细胞因子的间充质干细胞培养液。
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