[发明专利]基于上转换荧光的能量共振转移技术用于外泌体的检测

摘要

本发明公开一种基于上转换纳米材料和四甲基罗丹明的荧光能量共振转移用于外泌体的检测，涉及稀土掺杂上转换纳米材料为荧光探针的传感器，通过携带UCNPs和TAMRA的两条不同的EpCAM蛋白适配体DNA链，能识别到外泌体表面的EpCAM蛋白并结合到该蛋白上，形成发夹结构，导致UCNPs与TAMRA间的距离拉近到小于10 nm，从而发生荧光共振能量转移，产生荧光信号；该传感器的优点：稀土掺杂的上转换发光纳米材料由于其独特的反斯托克斯发光性能，具有光化学稳定性，无自体荧光；避免使用蛋白等昂贵的试剂、简化了实验流程；该方法基于荧光能量共振转移原理检测具有高灵敏度。可用于乳腺癌细胞来源外泌体的高灵敏检测。

主权项

1.一种用于外泌体浓度检测的荧光生物传感器，其特征在于：包括UCNPs、TAMRA 修饰的EpCAM‑2和UCNPs修饰的EpCAM‑1（DNA），所述的EpCAM‑1的DNA序列为：5’‑CACTACAGAGGTTGCGTCTGT‑3’, 5’端修饰‑COOH；EpCAM‑2的碱基序列为： 5’‑CCCACGTTGTCATGGGGGGTTGGCCTG‑3’, 3’ 端修饰TAMRA；携带UCNPs和TAMRA的两条不同的EpCAM蛋白适配体DNA链（EpCAM‑1‑UCNPs，EpCAM‑2‑TAMRA），能识别到外泌体表面的EpCAM蛋白并结合到该蛋白上，形成发夹结构，导致UCNPs与TAMRA之间的距离拉近到小于10 nm，从而发生荧光共振能量转移，当在980 nm近红外光激发下，TAMRA会发出黄色荧光，利用585 nm处荧光强弱的变化，能进行溶液中外泌体的定量分析。