[发明专利]一种负载有两种抗肝癌药物且具有双层控释-光热-靶向功能的纳米微粒的制备方法

摘要

本发明涉及制药领域，公开了一种负载有两种抗肝癌药物且具有双层控释‑光热‑靶向功能的纳米微粒的制备方法。本发明先在羧甲基壳聚糖上以亲水性的聚丙烯酰胺为桥架，修饰上羧甲基普鲁兰多糖，在增加其亲水性的同时使其具有靶向功能；再以聚多巴胺负载抗癌药物多柔比星，并将其包埋于亲水性的聚乙烯吡咯烷酮和阿拉伯胶中，随后再将抗癌药索拉菲尼负载于聚乙烯吡咯烷酮和阿拉伯胶的油相的外表面，最后通过羧甲基壳聚糖‑聚丙烯酰胺‑羧甲基普鲁兰多糖纳米微粒水溶液包埋上述体系，得到负载有两种抗肝癌药物且具有双层控释‑光热‑靶向功能的纳米微粒。该聚合物微粒将可实现双层抗癌药物的控释，同时联合聚多巴胺的光热性来治疗肝癌。

主权项

1.一种负载有两种抗肝癌药物且具有双层控释‑光热‑靶向功能的纳米微粒的制备方法，其特征在于：以g和mL计，包括以下步骤：1）分别取2‑3 g Span 80和Op 10加入200‑250 mL环己烷中，搅拌5‑7 min；2）取0.18‑0.2 g NaHSO3加入10‑15 mL去离子水中，配得NaHSO3溶液；3）取4‑5 g丙烯酰胺和0.22‑0.25 g K2S2O8加入45‑50 mL去离子水中，搅拌至溶解后，倒入步骤1）所得溶液中，搅拌，升温至50‑60℃，并向溶液中缓慢滴加NaHSO3溶液，反应4‑5 h后，用 NaOH调节pH至6~8；将产物倾倒至甲醇溶液中沉析，过滤、用丙酮洗涤，滤出物在35‑45℃下干燥10‑12 h，研细，得到聚丙烯酰胺微粒，放入干燥器中备用；4）取2‑3 g羧甲基壳聚糖和1‑2 g羧甲基普鲁兰多糖溶于100‑150 mL去离子水中，再向溶液中加入1‑2 g聚丙烯酰胺微粒，超声1‑2 min后，边搅拌边加入1.5 ‑2 g 1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐和1.5 ‑2 gN‑羟基琥珀酰亚胺，超声2‑2.5 h后，用去离子水进行透析，每3‑4 h换一次水，48‑60 h后得到羧甲基壳聚糖‑聚丙烯酰胺‑羧甲基普鲁兰多糖纳米微粒水溶液；5）将1.0‑3.0 g抗癌药索拉非尼溶解分散于20‑30mL二甲基亚砜溶液中，搅拌、超声分散均匀，得到含有抗癌药物索拉非尼的有机相；6）将2‑4 g聚乙烯吡咯烷酮溶于30‑40 mL去离子水中配成水相溶液；7）在40‑45 mL乙醇与90‑100 mL水的混合溶液中加入40‑45 mL 30%氨水，振荡搅拌30‑45 min，得到混合溶液，将4‑5 g多巴胺加入30‑45 mL水溶解，然后加入到混合溶液中继续搅拌，20‑30h后离心，除去上清液，下层微粒用去离子水洗涤，后在35‑45℃下干燥10‑12 h，得到聚巴多胺纳米颗粒；8）称取1‑3 g聚巴多胺纳米粒子分散在100‑150 mL 浓度为8‑12mg/mL的多柔比星磷酸缓冲液中，遮光搅拌24‑30 h后，进行离心，除去上清液，然后洗涤下层颗粒，最后将其分散在20‑30 mL二甲基亚砜中，超声1‑2 min，得到均匀地聚多巴胺‑多柔比星分散液；9）将1‑2 g阿拉伯胶，3‑4 mg油酸单乙醇酰胺磺基琥珀酸单酯二钠在搅拌下加入到步骤6）中的水相溶液中；10）将聚多巴胺‑多柔比星分散液加到步骤9）所得水相溶液中，超声乳化，得到O/W初乳；11）将含有抗癌药物索拉非尼的有机相转移到O/W初乳中，超声处理，得到乳液；12）将步骤11）所得乳液转移至步骤4）所得的羧甲基壳聚糖‑聚丙烯酰胺‑羧甲基普鲁兰多糖纳米微粒水溶液中，加入2‑4 mL Op‑10，然后间歇超声，制得复乳液；13）将复乳液逐滴加入到 60‑80 mL水中，搅拌，陈化处理，待有机溶剂挥发完全后，使用冷冻高速离心机离心处理后，收集微粒；14）用去离子水将步骤13）所得微粒洗涤2‑3次以除去表面残留的试剂，冷冻干燥保存，制得负载有两种抗肝癌药物且具有双层控释‑光热‑靶向功能的纳米微粒。