[发明专利]一种筛选具有高蛋白质分泌能力的微生物的方法在审
| 申请号： | 201810938640.5 | 申请日： | 2018-08-17 |
| 公开（公告）号： | CN108865915A | 公开（公告）日： | 2018-11-23 |
| 发明（设计）人： | 李光飞;陶玲 | 申请（专利权）人： | 李光飞 |
| 主分类号： | C12N1/19 | 分类号： | C12N1/19;C12N1/02;C12R1/84 |
| 代理公司： | 西安铭泽知识产权代理事务所(普通合伙) 61223 | 代理人： | 李振瑞 |
| 地址： | 453600 河南省新*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明属于微生物技术领域，公开了一种筛选具有高蛋白质分泌能力的微生物的方法，包括如下步骤：S1、准备多克隆抗体血清；S2、选定固体培养基，并将固体培养基进行高温灭菌处理；待固体培养基降温至50℃～60℃时，向固体培养基中加入多克隆抗体，搅拌均匀后，倾倒入固体培养皿中，待用；S3、将待定微生物进行稀释后，涂布于固体培养皿中进行单菌落分离培养；S4、观察单菌落生长过程中所分泌蛋白质与多克隆抗体血清中的多克隆抗体中和反应形成的沉淀圈大小；S5、根据沉淀圈与菌落的直径比值，分析筛选具有较高蛋白质分泌能力的微生物。本申请的方法不仅能够快速筛选具有较高蛋白质分泌能力的微生物，而且具有普适性。 | ||
| 搜索关键词： | 分泌 多克隆抗体 固体培养基 高蛋白质 微生物 培养皿 沉淀圈 筛选 血清 微生物技术领域 单菌落分离 高温灭菌 快速筛选 生长过程 中和反应 单菌落 普适性 菌落 稀释 蛋白质 倾倒 观察 申请 分析 | ||
【主权项】：
1.一种筛选具有高蛋白质分泌能力的微生物的方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、准备与待定微生物所分泌蛋白质能够发生反应的多克隆抗体血清；S2、选定固体培养基，并将固体培养基在115℃～121℃条件下高温灭菌处理30min～40min；待固体培养基降温至50℃～60℃时，向固体培养基中加入多克隆抗体血清，搅拌均匀后，倾倒入固体培养皿中，待用；S3、将待定微生物进行稀释后，涂布于固体培养皿中进行单菌落分离培养；S4、观察单菌落生长过程中所分泌蛋白质与多克隆抗体血清中的多克隆抗体中和反应形成的沉淀圈大小；S5、根据沉淀圈与单菌落的直径比值，分析筛选得到具有高蛋白质分泌能力的微生物。
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