[发明专利]一种脂肪间充质干细胞诱导分化为血管内皮细胞的方法在审
| 申请号： | 201810910346.3 | 申请日： | 2018-08-10 |
| 公开（公告）号： | CN109112094A | 公开（公告）日： | 2019-01-01 |
| 发明（设计）人： | 朱建斌;江嘉豪;何美弟;陈炽峰;康斯敏;陈碧莹;蔡祥胜;王明珠;王进辉 | 申请（专利权）人： | 广东唯泰生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071;C12N5/0775;A61P15/10 |
| 代理公司： | 广州新诺专利商标事务所有限公司 44100 | 代理人： | 许英伟 |
| 地址： | 528200 广东省佛山市南海*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种脂肪间充质干细胞诱导分化为血管内皮细胞的方法，包括以下步骤：将脂肪组织清洗干净，加入与脂肪组织等体积的组织消化酶进行消化；消化结束后再加入与组织消化酶等体积的胰蛋白酶液进行消化；消化结束后离心去除上层油脂和消化液，沉淀为脂肪组织血管基质部分细胞；将血管基质部分细胞用生理盐水再次重悬并筛去大块组织，再用生理盐水清洗，离心去除上清液，清洗后的血管基质细胞用无血清增殖培养基接种培养，得到脂肪间充质干细胞；选取P3代脂肪间充质干细胞消化得到单细胞悬液，用无血清增殖培养基接种培养过夜；培养24小时后去除无血清增殖培养基，添加诱导培养液诱导培养，得到分化后的血管内皮细胞。本方法可以诱导得到有效的血管内皮细胞。 | ||
| 搜索关键词： | 脂肪间充质干细胞 血管内皮细胞 增殖培养基 消化 血管基质 脂肪组织 无血清 接种培养 离心去除 诱导分化 消化酶 细胞 清洗 生理盐水清洗 单细胞悬液 胰蛋白酶液 诱导培养液 大块组织 生理盐水 诱导培养 上清液 消化液 去除 重悬 沉淀 诱导 上层 分化 | ||
【主权项】：
1.一种脂肪间充质干细胞诱导分化为血管内皮细胞的方法，其特征在于包括以下步骤：(1)将脂肪组织清洗干净，加入与脂肪组织等体积的组织消化酶进行消化；(2)消化结束后再加入与组织消化酶等体积的胰蛋白酶液进行消化；(3)消化结束后离心去除上层油脂和消化液，沉淀为脂肪组织血管基质部分细胞；(4)将血管基质部分细胞用生理盐水再次重悬并筛去大块组织，再用生理盐水清洗，离心去除上清液，清洗后的血管基质细胞用无血清增殖培养基接种培养，得到脂肪间充质干细胞；(5)选取P3代脂肪间充质干细胞消化得到单细胞悬液，用无血清增殖培养基接种培养过夜；(6)培养24小时后去除无血清增殖培养基，添加诱导培养液诱导培养，得到分化后的血管内皮细胞。
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