[发明专利]一种法夫酵母细胞机械破壁的方法在审
| 申请号： | 201810795767.6 | 申请日： | 2018-07-19 |
| 公开（公告）号： | CN108865891A | 公开（公告）日： | 2018-11-23 |
| 发明（设计）人： | 李纪丰;石英杰;孙常明;华晓曼;蒋海燕;足立胜 | 申请（专利权）人： | 威海利达生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/06 | 分类号： | C12N1/06;C12R1/645 |
| 代理公司： | 北京志霖恒远知识产权代理事务所(普通合伙) 11435 | 代理人： | 孟阿妮 |
| 地址： | 264200 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种法夫酵母细胞机械破壁的方法，具体为：法夫酵母发酵液1‑4L在5000‑10000rpm下离心5‑10min后保留沉淀；再加入与离心前发酵液等体积的蒸馏水混匀后离心；将沉淀进行称重后用蒸馏水将浓度稀释至20‑50％，调节pH为5‑8；在压力70‑100Mpa，往复泵单次流量5‑8mL，往复泵伸出速度20‑50次/min的条件下，将菌液通过高压均质机进行破壁2‑5次；显微镜观察菌液中细胞全部破壁后离心，向沉淀中添加100‑1000mL有机溶剂萃取细胞内容物。本发明工艺简单，易于操作，破壁速度快，节约时间，可连续生产，适用于法夫酵母胞内虾青素、多糖、氨基酸和多肽的提取。 | ||
| 搜索关键词： | 破壁 蒸馏水 沉淀 法夫酵母细胞 法夫酵母 机械破壁 往复泵 菌液 有机溶剂萃取 高压均质机 细胞内容物 显微镜观察 浓度稀释 发酵液 前发酵 虾青素 氨基酸 称重 多肽 混匀 伸出 细胞 节约 保留 | ||
【主权项】：
1.一种法夫酵母细胞机械破壁的方法，其特征在于：所述方法的整体步骤为：步骤一，法夫酵母发酵液1‑4L在5000‑10000rpm下离心5‑10min后弃掉上清液，保留沉淀；步骤二，向沉淀中加入与步骤一中离心前发酵液相同体积的蒸馏水混匀，在5000‑10000rpm下离心5‑10min后弃掉上清液，保留沉淀；步骤三，将离心后的沉淀进行称重，称重后加入蒸馏水将浓度稀释至20‑50％，充分混匀，调节pH 5‑8；步骤四，在压力70‑100Mpa、往复泵单次流量5‑8mL、往复泵伸出速度20‑5次/min的条件下，将稀释后菌液通过高压均质机进行机械破壁2‑5次；步骤五，显微镜观察菌液中革兰氏染色后的细胞破壁情况；若仍存在完整的细胞壁，重复步骤四，直至所有细胞均破壁完成；步骤六，在5000‑10000rpm下离心5‑10min后弃掉上清液，向沉淀中添加100‑1000mL的有机溶剂，对细胞内含物进行萃取。
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