[发明专利]一种烟叶中多酚类化合物的检测方法

摘要

本申请属于烟草代谢组学技术领域，具体涉及一种烟叶中多酚类化合物的检测方法专利申请事宜。该方法利用液相色谱‑串联质谱联用仪来实现，可对烟叶中的中山奈酚、花青素、氯化花翠素、鼠李金、绿原酸、飞燕草素葡萄糖苷、原花青素B2、花青素鼠李糖苷、芸香苷和莨菪亭中一种或任意几种同时检测。该方法包括：对预处理后新鲜烟叶进行萃取，制备待检液，液相色谱‑串联质谱检测分析等操作。相对于常规的多酚检测分析方法，本申请所提供检测方法具有分析速度快、研究对象多、精密度好、加标回收率高、稳定性良好等优点，因而具有较好的实用价值和推广应用意义。

主权项

1.一种烟叶中多酚类化合物的检测方法，其特征在于，该方法利用液相色谱‑串联质谱联用仪来实现，可对烟叶中的中山奈酚、花青素、氯化花翠素、鼠李金、绿原酸、飞燕草素葡萄糖苷、原花青素B2、花青素鼠李糖苷、芸香苷和莨菪亭中一种或任意几种同时检测；具体包括如下步骤：（一）对预处理后新鲜烟叶进行萃取首先，对待测新鲜烟叶进行预处理，具体而言：先用液氮速冻，冷冻干燥后，再用粉碎机打碎备用；其次，用萃取溶剂对打碎后新鲜烟叶进行萃取；（二）制备待检液分离获得步骤（一）中含有植物多酚的萃取相，冷冻、离心，取上清液冷冻干燥；将冷冻干燥后的样品复溶后离心，取上清液备用待检；（三）液相色谱‑串联质谱检测分析液相色谱、质谱条分析时，具体参数参考设置如下：色谱柱：BEH Phenyl色谱柱，柱的规格为：2.1×150 mm，1.7 μm；色谱检测分析时：柱温，35℃；流动相为：A，含0. 1%甲酸的水；B，含0. 1%甲酸的甲醇；流速：0.3 mL/ min；进样量：1μL；梯度洗脱：0~2min：B 相由5% 升到15%；2 min‑10 min ：B相保持15%；10.01 min‑15 min：B相升到100%；质谱检测分析时：离子源：电喷雾离子源，正离子扫描，实时多反应监测（MRM模式，multi reaction monitoring）；干燥气温度：290℃；干燥气流量：12 L/min；雾化器压力：40 psi；鞘气温度：200℃，鞘气流量：11L/min；正离子电离模式下毛细管电压：4 kV。