[发明专利]以尿液为检测样本的早孕检测试剂盒、其生产方法及用途

摘要

本发明属于医疗保健技术领域，具体提供了一种以尿液为检测样本的早孕检测试剂盒的生产方法，该生产方法采用胶体金免疫层析技术原理，应用双抗体夹心法技术，在硝酸纤维素膜的T1检测线包被抗β‑HCG核心片段单抗，T2检测线包被抗α‑HCG单抗，质控线包被羊抗鼠IgG多抗抗体。并通过一些列生产工艺操作步骤和工艺参数的控制，生产获得一种灵敏度和特异性高、稳定性好、并能够快速的对是否怀孕以及是否异位妊娠进行检测。相应的，本发明还提供了所述生产方法相应的产品和用途。

主权项

1.一种以尿液为检测样本的早孕检测试剂盒的生产方法，其特征在于，包括以下步骤：Step1.NC膜的制备：将25*300mm的NC膜粘贴在75*300mm的PVC底板上。Step2.包被液的配制：用磷酸盐缓冲液配制浓度为1.2mg/ml的抗β‑HCG核心片段单抗、浓度为1.0mg/ml的抗α‑HCG单抗、浓度为1.0mg/ml的羊抗鼠IgG多抗抗体。Step3.NC膜的包被及干燥：将配置好的抗β‑HCG核心片段单抗、抗α‑HCG单抗和羊抗鼠IgG多抗抗体依次分别包被在NC膜上的T1检测线、T2检测线和质控线C上；包被完成后45℃条件下干燥48±3h得到包被干燥好的NC膜备用。Step4.制备化学偶合物垫：将5％的海藻糖、0.1％BSA、12.2％的2mM硼酸和0.1％PEG缓冲液加入配液罐，用TE缓冲液定容至所需体积，搅拌均匀，将玻璃纤维素膜置入浸泡30分钟后取出，37℃干燥得到化学偶合物垫备用。Step5.制备样品垫：将1％的海藻糖、1.2％的酪蛋白，用2mM硼酸和0.1％PEG缓冲液定容至所需体积，搅拌均匀，将玻璃纤维素膜置入浸泡30分钟后取出，37℃干燥得到封闭的样品垫备用。Step6.胶体金的制备：称取柠檬酸三钠溶于纯化水，加热煮沸，加入1％的四氯金酸反应直至溶液变为酒红色，冷却至室温存放。Step7.胶体金的标记：取冷却至室温的胶体金溶液，用1M碳酸钾及6M盐酸调节PH值为6.9±0.05，按0.5mg/100ml加入抗β‑HCG核心片段单抗，反应15分钟后加入2％BSA溶液进行封闭，30分钟后反应结束，离心纯化得到标记好的胶体金偶合物溶液，胶体金偶合物溶液体积约为胶体金溶液体积的1％。Step8.胶体金包被：将标记好的胶体金偶合物溶液稀释，均匀包被在化学偶合物垫上，37℃干燥12±2h得到包被并干燥的化学偶合物垫。Step9.装配：将包被干燥好的NC膜、包被并干燥的化学偶合物垫、封闭的样品垫及吸水纸层压在一起，切割封装即得到以尿液为检测样本的早孕检测试剂盒。