[发明专利]一种钩藤的组织培养方法

摘要

本发明公开了一种钩藤的组织培养方法，包括外植体的选择、外植体的清洁与消毒、丛生芽诱导、丛生芽增殖及生根等步骤。本发明对钩藤组织培养技术展开了探索，确立了无菌材料的获得、丛生芽的诱导、丛生芽的增殖、丛生芽的生根等理想培养条件，最终成功建立了钩藤的组织培养体系，为实现对钩藤野生资源的保护、优质种质保存以及优质种质规模化种植奠定了技术基础，解决野生钩藤野生资源过度开发、规范化规模化种植种苗瓶颈等问题。

主权项

1.一种钩藤的组织培养方法，其特征在于按以下步骤进行：(1)外植体的选择：选择健壮植株，剪取取无病虫害幼嫩带芽茎段；(2)外植体的清洁消毒：将选取的外植体剪成带芽小段后用饱和肥皂水溶液涮洗后冲淋，在超净工作台上依次用酒精、漂白粉溶液及升汞溶液消毒；(3)丛生芽诱导培养：将消毒好的外植体，去掉两端切至1‑2cm带芽茎段，接种在以1/2MS或WPM为基本培养基，添加NAA、KT、GA3、活性炭等活性物质的诱导培养基上，在一定温度、光照强度和光周期环境下培养；(4)丛生芽增殖培养：将诱导出的丛生芽剪成单芽，接种在以MS、WPM交替使用的基本培养基，添加ZT、KT、GA3、活性炭等活性物质的增殖培养基上，在一定温度、光照强度和光周期的环境下培养；(5)丛生芽生根培养：将增殖的无根苗，接种在以1/2WPM为基本培养基，添加NAA、IBA、多效唑、活性炭等活性物质的生根培养基上，在一定温度、光照强度和光周期的环境下培养。