[发明专利]一种以含萘雨水为底物的降解菌的筛选方法在审
| 申请号： | 201810732738.5 | 申请日： | 2018-07-05 |
| 公开（公告）号： | CN108823142A | 公开（公告）日： | 2018-11-16 |
| 发明（设计）人： | 范晓丹;吴静;张襄楷 | 申请（专利权）人： | 天津城建大学 |
| 主分类号： | C12N1/36 | 分类号： | C12N1/36;C12N1/20;C12R1/01 |
| 代理公司： | 天津市北洋有限责任专利代理事务所 12201 | 代理人： | 张宏祥 |
| 地址： | 300384 天津市*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明公开来了一种以含萘雨水为底物的降解菌的筛选方法：(1)采用逐步提高萘浓度的方法对以含萘雨水为底物的活性污泥进行梯度驯化：(2)取驯化的活性污泥稀释102～105倍，涂布于固体培养基上，置于恒温培养箱中培养1～4天，挑取数量最多的菌落，划线分离纯化；(3)挑取直径为4mm范围内纯化优势菌落或单菌落置于250mL液体培养基中富集培养3天，得到以含萘雨水为唯一碳源的降解菌株。本发明根据污水处理厂剩余污泥中富含降解菌的特点，以驯化替代初期富集培养，既节省了分筛培养的过程，简化了筛选流程，同时也显著降低了降解菌的筛选成本，为开发多环芳烃污染处理用微生物资源提供了新途径。 | ||
| 搜索关键词： | 降解菌 雨水 底物 筛选 富集培养 活性污泥 驯化 多环芳烃污染 固体培养基 恒温培养箱 微生物资源 污水处理厂 液体培养基 划线分离 降解菌株 剩余污泥 梯度驯化 唯一碳源 优势菌落 单菌落 新途径 菌落 稀释 分筛 富含 替代 开发 | ||
【主权项】：
1.一种以含萘雨水为底物的降解菌的筛选方法，具有如下步骤：(1)梯度驯化采用逐步提高萘浓度的方法对以含萘雨水为底物的活性污泥进行梯度驯化：将沉降比为20％的活性污泥与取自沥青路面的地表径流雨水按质量比1:2混合，驯化期内，在雨水中首次加入萘的量为5mg/L，再将雨水与营养物质按体积比1:1混合；采用每隔2天排水1次，每次排100mL，同时进100mL含萘雨水，而后营养物质每天减少10％，10天后降为0，不再加营养物质，再每隔6天增加雨水中萘的浓度，每次增加的梯度为5mg/L，30天后增加到30mg/L为止；(2)分离纯化取驯化的活性污泥稀释102～105倍，将其涂布于固体培养基上，置于20‑30℃恒温培养箱中倒置平板培养1～4天，挑取数量最多的菌落，划线分离纯化；(3)富集培养挑取直径为4mm范围内纯化优势菌落置于250mL液体培养基中富集培养3天，得到以含萘雨水为唯一碳源的降解菌株。
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