[发明专利]一种牛冻精X、Y精子分离方法在审
| 申请号： | 201810729487.5 | 申请日： | 2018-07-05 |
| 公开（公告）号： | CN108865982A | 公开（公告）日： | 2018-11-23 |
| 发明（设计）人： | 生卫东;徐美芳;贺亚南;陈志南;张志鹏;田全召 | 申请（专利权）人： | 河南省鼎元种牛育种有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/076 | 分类号： | C12N5/076;A01N1/02 |
| 代理公司： | 郑州华智星知识产权代理事务所(普通合伙) 41145 | 代理人： | 刘迪 |
| 地址： | 450000 河南*** | 国省代码： | 河南;41 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明属于牛冻精生产技术领域，具体涉及一种牛冻精X、Y精子分离方法，包括配置Staining液和稀释液，Staining液中各成分及其终浓度为：Hepes：9.520g/L，MgCl2·6H2O：0.08g/L，NaCl：5.518g/L，KCl：0.224g/L，Na2HPO4：0.04g/L，NaHCO3：0.84g/L，Napy：0.22g/L，葡萄糖：0.90g/L，Nalatctate：3.61ml/L，BSA：3.0g/L，庆大霉素：2.5ml/L；将牛冷冻冻精解冻，解冻后离心，弃上清液，计算沉淀精子数量；用Staining液将沉淀精子稀释至浓度为1×108个精子/ml，然后加入荧光染料，混合均匀后置于水浴中静置，水浴后用流式细胞仪使X、Y精子分离，将X或Y精子置于冰箱中平衡，平衡后离心，弃上清液，收集沉淀X或Y精子，向X或Y精子中加稀释液后冷冻保存。该方法分离效率高，性别控制准确率可达92％以上。 | ||
| 搜索关键词： | 精子 沉淀 上清液 稀释液 水浴 解冻 流式细胞仪 葡萄糖 分离效率 冷冻保存 庆大霉素 生产技术 性别控制 荧光染料 准确率 平衡 稀释 冷冻 冰箱 配置 | ||
【主权项】：
1.一种牛冻精X、Y精子分离方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤(1)配置Staining液和稀释液1.1)Staining液Staining液中各成分及其终浓度为：Hepes：9.520g/L，MgCl2·6H2O：0.08g/L，NaCl：5.518g/L，KCl：0.224g/L，Na2HPO4：0.04g/L，NaHCO3：0.84g/L，Napy：0.22g/L，葡萄糖：0.90g/L，Nalatctate：3.61ml/L，BSA：3.0g/L，庆大霉素：2.5ml/L；1.2)稀释液稀释液包括796份工作液、204份蛋黄，以及终浓度为0.007467ml/ml庆大霉素、终浓度为0.005633ml/ml的抗生素泰勒菌素和林肯霉素，所述的工作液中各成分及其终浓度为：Tris 30.44g/L，柠檬酸17.21g/L，果糖12.65g/L；步骤(2)将牛冷冻冻精解冻，解冻后离心，弃上清液，计算沉淀精子数量；步骤(3)用Staining液将步骤(2)所得的沉淀精子稀释至浓度为1×108个精子/ml，然后加入荧光染料，混合均匀后置于水浴中静置，水浴后用流式细胞仪使X、Y精子分离，将X或Y精子置于冰箱中平衡，平衡后离心，弃上清液，收集沉淀X或Y精子，向X或Y精子中加稀释液后冷冻保存。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于河南省鼎元种牛育种有限公司，未经河南省鼎元种牛育种有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201810729487.5/，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：藻蓝蛋白促进生成诱导多能干细胞的应用
- 下一篇：一种细胞外泌体的提取方法
