[发明专利]动物线粒体DNA的纯化方法在审
| 申请号： | 201810612779.0 | 申请日： | 2018-06-14 |
| 公开（公告）号： | CN108728433A | 公开（公告）日： | 2018-11-02 |
| 发明（设计）人： | 杨仙玉;贾宇坤;张先福;马敬华;施伟斌;刘建勋 | 申请（专利权）人： | 浙江农林大学;杭州野生动物世界有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 绍兴市知衡专利代理事务所(普通合伙) 33277 | 代理人： | 施春宜 |
| 地址： | 311300 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本申请涉及一种动物线粒体DNA的纯化方法，属于包含酶或微生物的测定或检测方法技术领域。将待检测动物组织中加入裂解液，研磨成浆后常温离心，取上清液加入到DNA结合柱进行纯化，所述DNA结合柱表面偶联有带正电荷的二乙胺乙醇亲水性树脂，裂解处理后的浆液中的DNA结合到DNA结合柱上并完成纯化，纯化完毕的DNA结合柱加入灭菌水中，静置并常温离心，即可得到待检测动物的线粒体DNA；所述裂解液中蛋白酶K和RNase A的浓度分别为20μg/mL、10μg/mL，裂解温度为37℃，裂解时间为5min‑3h。将本申请应用于肉源的鉴定，具有操作简便、获取率高、成本低廉等优点。 | ||
| 搜索关键词： | 裂解 动物线粒体DNA 常温离心 裂解液 检测 亲水性树脂 线粒体DNA 动物组织 取上清液 蛋白酶K 研磨 二乙胺 正电荷 灭菌 乙醇 成浆 偶联 水中 申请 微生物 应用 | ||
【主权项】：
1.动物线粒体DNA的纯化方法，其特征在于：将待检测动物组织中加入裂解液，常温下研磨匀浆后离心，取上清液加入到DNA结合柱进行纯化，所述DNA结合柱表面偶联有带正电荷的二乙胺乙醇亲水性树脂，裂解处理后的浆液中的DNA结合到DNA结合柱上并完成纯化，纯化完毕的DNA结合柱中加入灭菌水，静置并常温离心，即可得到待检测动物的线粒体DNA；所述裂解液中蛋白酶K和RNase A的浓度分别为20μg/mL、10μg/mL，裂解温度为37℃，裂解时间为5min‑3h。
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