[发明专利]一种自体生发层脂肪间充质活性细胞提取方法及应用在审
| 申请号： | 201810557602.5 | 申请日： | 2018-06-01 |
| 公开（公告）号： | CN108728409A | 公开（公告）日： | 2018-11-02 |
| 发明（设计）人： | 白晋 | 申请（专利权）人： | 白晋 |
| 主分类号： | C12N5/0775 | 分类号： | C12N5/0775;C12N5/077;A61L27/36;A61L27/38 |
| 代理公司： | 北京知呱呱知识产权代理有限公司 11577 | 代理人： | 武媛;吕学文 |
| 地址： | 100853 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种自体生发层脂肪间充质活性细胞提取方法及应用，其方法包括以下步骤：步骤A：采集脂肪组织，机械破碎，并用生理盐水清洗；步骤B：将破碎的脂肪组织加入缓冲液搅拌至澄清，除去损伤组织、血液和红细胞；步骤C：将脂肪组织加入质量浓度为0.20％的Ⅰ型胶原酶和Ⅱ型胶原酶混合酶液混匀，摇床培养，离心获得沉淀脂肪间充质活性细胞。本发明的脂肪间充质活性细胞制剂的制备方法及应用，其制备的脂肪间充质活性细胞，由于加入了血液细胞液，使得脂肪间充质活性细胞的增殖能力比较强，该脂肪间充质活性细胞制剂可用于整形美容，尤其是置入到接受治疗的区域，具有除皱美容的良好效果。 | ||
| 搜索关键词： | 活性细胞 间充质 脂肪 脂肪组织 胶原酶 生发层 自体 制备 生理盐水清洗 红细胞 血液 应用 混合酶液 机械破碎 损伤组织 摇床培养 增殖能力 整形美容 缓冲液 细胞液 除皱 混匀 可用 置入 沉淀 破碎 美容 并用 采集 澄清 治疗 | ||
【主权项】：
1.一种自体生发层脂肪间充质活性细胞提取方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：步骤A：采集脂肪组织，机械破碎，并用生理盐水清洗；步骤B：将破碎的脂肪组织加入缓冲液搅拌至澄清，除去损伤组织、血液和红细胞；步骤C：将脂肪组织加入质量浓度为0.20％的Ⅰ型胶原酶和Ⅱ型胶原酶混合酶液混匀，摇床培养，离心获得沉淀脂肪间充质活性细胞；步骤D：将沉淀脂肪间充质活性细胞，用含5％‑10％的血清的DMEM或者D/F细胞培养基进行扩大培养，以增加脂肪间充质活性细胞数量；步骤E：将第4‑6代大规模生产的脂肪组织脂肪间充质活性细胞放入培养瓶中，以成脂肪细胞诱导分化的培养基进行诱导培养；步骤F：细胞在显微镜下观察存在脂质小泡，将脂肪间充质活性细胞进行消化处理，以普通培养基重悬制成脂肪间充质活性细胞悬液，备用。
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