[发明专利]一种山药DNA提取的新方法在审
| 申请号： | 201810552949.0 | 申请日： | 2018-05-31 |
| 公开（公告）号： | CN110551710A | 公开（公告）日： | 2019-12-10 |
| 发明（设计）人： | 薛刚 | 申请（专利权）人： | 北京科奥明生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 11508 北京维正专利代理有限公司 | 代理人： | 俞光明 |
| 地址： | 100123 北京市朝*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种山药DNA提取的新方法，包括：S1鲜山药去皮、洗净，在液氮中磨成山药粉；S2将山药粉在2‑8倍重量的水中，水热处理1‑2h获得混合浆液，处理温度为40‑50℃，混合浆液经离心获得沉淀物；取沉淀物5‑10g，加入15‑20mL 65℃预热的裂解缓冲液和300‑400μL的β‑巯基乙醇，混合均匀，于60‑70℃下保温40‑50min;加入15‑20mL体积比为25:24:1的酚‑氯仿‑异戊醇溶液，混合后，室温下离心分离获得上清液；S4向上清液中加入等体积的异丙醇，出现絮状沉淀，离心分离获得DNA沉淀；S5 DNA洗涤：用体积浓度为75%的乙醇洗涤DNA沉淀，达到了提高山药DNA纯度的效果。 | ||
| 搜索关键词： | 混合浆液 山药 裂解缓冲液 取沉淀物 水热处理 絮状沉淀 乙醇洗涤 巯基乙醇 山药粉 上清液 体积比 鲜山药 异丙醇 异戊醇 预热的 氯仿 清液 去皮 水中 洗净 药粉 液氮 保温 | ||
【主权项】：
1.一种山药DNA提取的新方法，其特征在于：包括有以下步骤：/nS1液氮研磨：鲜山药去皮、洗净，在液氮中磨成山药粉；/nS2水热处理：将山药粉在2-8倍重量的水中，水热处理1-2h获得混合浆液，处理温度为40-50℃，混合浆液经离心获得沉淀物；/nS3 DNA提取：取沉淀物5-10g，加入15-20mL 65℃预热的裂解缓冲液和300-400μL的β-巯基乙醇，混合均匀，于60-70℃下保温40-50min;加入15-20mL体积比为25:24:1的酚-氯仿-异戊醇溶液，混合后，室温下离心分离获得上清液；/nS4 DNA分离：向上清液中加入等体积的异丙醇，出现絮状沉淀，离心分离获得DNA沉淀；/nS5 DNA洗涤：用体积浓度为75%的乙醇洗涤DNA沉淀，获得山药DNA。/n
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