[发明专利]一种羊肚菌菌种分离方法

摘要

本发明公开了一种羊肚菌菌种分离方法，属羊肚菌分离方法领域。利用这种方法，用特定规格透明长方体玻璃瓶作母种容器，按特定配方制得培养基。把基部带土的羊肚菌种菇削至见斑状菌肉，挑取0.3毫米见方菌土混合体，直接接菌到容器内培养基平面的后部。在特定温度下，经1‑2次提纯，即可得到羊肚菌纯菌丝体。与现有羊肚菌菌种分离方法相比，这种分离方法操作简单，成功率高，解决了羊肚菌生产中菌种分离成功率过低的技术瓶颈问题。

主权项

1.一种羊肚菌菌种分离方法，其特征在于：具体分离步骤如下：步骤1）选择母种容器：用长15厘米，宽6厘米，高4厘米，瓶口直径为2.5厘米的高透明长方体玻璃瓶作母种容器；步骤2）备制母种培养基：各原料及其用量为：纯净水1100毫升，新鲜去皮土豆200克，小麦50克，琼脂20克，葡萄糖18克，磷酸二氢钾0.2克，硫酸镁0.1克，维生素B1为3毫克；母种培养基的制备方法为：在不锈钢锅里加水1100毫升，把新鲜去皮土豆200克切成0.5厘米薄片，和50克小麦一起加入水中，小火煮沸15分钟后过滤，取滤汁1000毫升，加入20克琼脂，小火煮至完全融化，然后加入葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁和维生素B1，得到母种培养基，装入母种容器，每瓶装母种培养基20毫升，用棉塞或透气胶塞封口，放入灭菌锅，在120°C下保持15分钟后取出，平放进超净工作台或其它无菌处，凝固待用；步骤3）挑选种菇：种菇的主要标准，一是要在头潮菇中选择；二是种菇的商品性和农艺性状突出；三是子实体健壮、无畸形、无病虫害；四是选择6‑8成熟的子实体；种菇要带基质土一起拔出，在采摘后2小时内进行分离培养；步骤4）母种分离方法：首先用刀片把种菇基部的土削至见60‑70%菌肉，在无菌条件下，挑取种菇基部的菌肉和基质土混合物0.3立方厘米方块，过酒精灯火焰后接入备好的母种培养基平面，靠底部放置，封口后培养；步骤5）菌丝培养与提纯：将做好分离的羊肚菌母种瓶放在提前消毒过的暗培养室培养，室内温度保持16°C，其室内空间相对湿度保持30‑40%，培养 48‑72小时；生长前端的菌丝体即是羊肚菌菌丝体；挑取前端的菌丝体接入新的母种培养基中，如此1‑2次，即可获得羊肚菌纯菌丝体，即羊肚菌母种。