[发明专利]MiR-210在胶质瘤中相关靶点预测的实验方法在审
| 申请号： | 201810481695.8 | 申请日： | 2018-05-18 |
| 公开（公告）号： | CN108918874A | 公开（公告）日： | 2018-11-30 |
| 发明（设计）人： | 蔺玉昌;苗增利;徐幸;秦琪珑 | 申请（专利权）人： | 无锡市第二人民医院 |
| 主分类号： | G01N33/574 | 分类号： | G01N33/574;G01N21/64 |
| 代理公司： | 温州知远专利代理事务所(特殊普通合伙) 33262 | 代理人： | 汤时达 |
| 地址： | 214000*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了MiR‑210在胶质瘤中相关靶点预测的实验方法，其特征为，括如下步骤：1)选取U251及U87‑MG胶质瘤细胞系，应用加入10％胎牛血清和1％青霉素或者链霉素的D‑MEM高糖培养基进行培养，分别分成正常组和低氧组，正常组置于5％CO2、37℃进行正常培养，低氧组置于2％O2、5％CO2、93％N2、37℃进行培养；选取手术切除的胶质母细胞瘤标本，以正常组织为对照，标本储存在‑80℃冰箱；2)利用Tumor Suppressor蛋白芯片技术筛选出胶质母细胞瘤中表达降低的蛋白，以正常脑组织为对照；同时应用细胞系中低氧组细胞进行蛋白芯片实验，以正常组为对照，根据DAVID数据库，利用细胞系蛋白芯片的结果选出和胶质瘤缺氧相关的蛋白，然后把筛选结果和胶质母细胞瘤标本中的结果进行对比，选出表达趋势一致的目标靶点蛋白。 | ||
| 搜索关键词： | 胶质母细胞瘤 胶质瘤 正常组 低氧 蛋白 蛋白芯片 靶点 筛选 蛋白芯片技术 胶质瘤细胞系 高糖培养基 正常脑组织 标本储存 目标靶点 手术切除 胎牛血清 正常组织 青霉素 标本 链霉素 预测 应用 数据库 缺氧 冰箱 细胞 | ||
【主权项】：
1.MiR‑210在胶质瘤中相关靶点预测的实验方法，其特征为，括如下步骤：1)选取U251及U87‑MG胶质瘤细胞系，应用加入10％胎牛血清和1％青霉素或者链霉素的D‑MEM高糖培养基进行培养，分别分成正常组和低氧组，正常组置于5％CO2、37℃进行正常培养，低氧组置于2％O2、5％CO2、93％N2、37℃进行培养；选取手术切除的胶质母细胞瘤标本，以正常组织为对照，标本储存在‑80℃冰箱；2)利用Tumor Suppressor蛋白芯片技术筛选出胶质母细胞瘤中表达降低的蛋白，以正常脑组织为对照；同时应用细胞系中低氧组细胞进行蛋白芯片实验，以正常组为对照，根据DAVID数据库，利用细胞系蛋白芯片的结果选出和胶质瘤缺氧相关的蛋白，然后把筛选结果和胶质母细胞瘤标本中的结果进行对比，选出表达趋势一致的目标靶点蛋白，通过TargetScan靶点预测软件初步确定胶质瘤中与miR‑210密切相关的靶点。
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