[发明专利]一种循环肿瘤细胞检测方法

摘要

本发明涉及一种循环肿瘤细胞检测方法，其特征在于：包括如下步骤：(1)、通过荧光显微镜采集三个不同通道的荧光图像，三个不同通道对应的荧光图像分别为绿色荧光图像、红色荧光图像和蓝色荧光图像；(2)、对采集的绿色荧光图像、红色荧光图像和蓝色荧光图像分别进行初始化处理；步骤、得到三幅剔除了干扰细胞的绿色荧光图像、红色荧光图像和蓝色荧光图像；(4)、将(3)所得到的剔除了干扰细胞的绿色荧光图像、红色荧光图像和蓝色荧光图像进行合成。与现有技术相比，本发明对细胞层面分析处理，能够解决传统显微图像在像素层面处理产生的大量空洞和噪声问题，可以有效的去除由于噪生所带来的误检，从而提高检测的准确性。

主权项

1.一种循环肿瘤细胞检测方法，其特征在于：包括如下步骤步骤(1)、通过荧光显微镜采集三个不同通道的荧光图像，三个不同通道对应的荧光图像分别为绿色荧光图像、红色荧光图像和蓝色荧光图像；步骤(2)、将步骤(1)采集的绿色荧光图像、红色荧光图像和蓝色荧光图像分别进行初始化处理：步骤(2‑1)、首先利用最大类间方差法获得绿色荧光图像和红色荧光图像和蓝色荧光图像中每一个细胞所在的初始化区域；步骤(2‑2)、对绿色荧光图像、红色荧光图像和蓝色荧光图像中所有获得的初始化区域进行中值滤波，滤波的卷积核大小为N*N，N的取值为2～5，分别得到滤波后的绿色荧光图像和红色荧光图像和蓝色荧光图像；步骤(2‑3)、利用分水岭算法对滤波后的绿色荧光图像、红色荧光图像和蓝色荧光图像进行分割处理，然后将每一个分割出来的细胞的位置、面积和平均亮度记录下来，从而分别得到绿色荧光图像、红色荧光图像和蓝色荧光图像中被分割出来的细胞的位置、面积和平均亮度；步骤(3)、将步骤(2)所得的绿色荧光图像、红色荧光图像和蓝色荧光图像中被分割出来的所有细胞的平均亮度分别进行自亮到暗的排序，然后分别找出前10％的细胞中位于下临界值的细胞的平均亮度，作为阳性细胞亮度判别阈值，找出后10％的细胞中位于上临界值细胞的平均亮度，作为阴性细胞亮度判别阈值；阳性细胞的判断标准为该细胞的平均亮度大于等于阳性细胞亮度判别阈值；阴性细胞的判断标准为该细胞的平均亮度小于等于阴性细胞亮度判别阈值；步骤(4)、根据步骤(3)的判断原则，找到绿色荧光图像中的阴性细胞，记录绿色荧光图像中所有的非阴性细胞的细胞位置，并予以剔除；同时根据记录的绿色荧光图像中所有的非阴性细胞的细胞位置，剔除在红色荧光图像和蓝色荧光图像中相同位置的细胞，并更新红色荧光图像和蓝色荧光图像中的细胞分布；然后，同样根据步骤(3)的判断原则，找到蓝色荧光图像中的阳性细胞，记录蓝色荧光图像中所有非阳性细胞的细胞位置，并予以剔除，同时剔除在绿色荧光图像和红色荧光图像中相同位置的细胞，并更新绿色荧光图像和红色荧光图像中的细胞分布；最后，同样根据步骤(3)的判断原则，找到红色荧光图像中的阳性细胞，记录红色荧光图像中所有非阳性细胞的位置，并予以剔除，同时剔除在绿色荧光图像和蓝色荧光图像中相同位置的细胞，并更新绿色荧光图像和蓝色荧光图像中的细胞分布；从而得到三幅剔除了干扰细胞的绿色荧光图像、红色荧光图像和蓝色荧光图像；步骤(5)、将步骤(4)所得到的剔除了干扰细胞的绿色荧光图像、红色荧光图像和蓝色荧光图像进行合成，合成的标准有：a、同时存在于绿色荧光图像、红色荧光图像和蓝色荧光图像中的细胞被保留；b、在蓝色荧光图像中的细胞面积大于红色荧光图像中的细胞面积的细胞被保留；同时满足a和b条件的细胞被保留，这些细胞作为检测到的循环肿瘤细胞，输出到最终的检测报告中。