[发明专利]一种筛选标记自主控制剔除转基因载体及其在玉米无标记转基因育种中的应用在审
| 申请号： | 201810414159.6 | 申请日： | 2018-05-03 |
| 公开（公告）号： | CN108588114A | 公开（公告）日： | 2018-09-28 |
| 发明（设计）人： | 张方东;杜邓襄 | 申请（专利权）人： | 华中农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;C12N15/65;A01H5/00;A01H6/46 |
| 代理公司： | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人： | 刘奇 |
| 地址： | 430000 湖北省武汉市洪山区狮子山*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种筛选标记自主控制剔除转基因载体及其在玉米无标记转基因育种中的应用，属于玉米分子育种技术领域，所述载体以pEGAD载体为骨架载体，使用EGFP和IPT基因的融合基因替换bar基因作为筛选标记；所述筛选标记的表达框整合在Cre/lox位点特异性重组系统中。所述应用包括以下步骤：将所述的载体转入玉米胚性愈伤组织中，获得有绿色荧光表达的玉米胚性愈伤组织；热激处理后，分化生根培养无绿色荧光表达的玉米胚性愈伤组织获得转基因植株。所述载体提高了筛选效率，同时实现了转基因筛选标记的剔除，为大范围开展无标记的玉米转基因工作提供了理论和应用基础。 | ||
| 搜索关键词： | 筛选标记 愈伤组织 无标记 玉米胚 剔除 转基因育种 转基因载体 绿色荧光 自主控制 位点特异性重组系统 应用 理论和应用 玉米转基因 转基因植株 骨架载体 热激处理 融合基因 生根培养 玉米分子 育种技术 玉米 表达框 转基因 整合 替换 筛选 转入 分化 | ||
【主权项】：
1.一种筛选标记自主控制剔除转基因载体，其特征在于，以pEGAD载体为骨架载体，使用绿色荧光蛋白基因EGFP和异戊烯基转移酶IPT基因的融合基因替换所述pEGAD载体上的bar基因作为筛选标记；所述筛选标记的表达框整合在Cre/lox位点特异性重组系统中，所述Cre/lox位点特异性重组系统连接热激诱导型启动子，由热激诱导型启动子激活重组酶驱动位点特异性重组产生。
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