[发明专利]一种怀山药遗传转化的方法在审
| 申请号： | 201810400964.3 | 申请日： | 2018-04-28 |
| 公开（公告）号： | CN108728481A | 公开（公告）日： | 2018-11-02 |
| 发明（设计）人： | 李明军;李俊华;赵喜亭;蒲腾飞;刘世宇;韩林林;宋志辉 | 申请（专利权）人： | 河南师范大学 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;A01H5/00;A01H6/00 |
| 代理公司： | 新乡市平原智汇知识产权代理事务所(普通合伙) 41139 | 代理人： | 路宽 |
| 地址： | 453007 河*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种怀山药遗传转化的方法，属于植物基因工程技术领域。本发明的技术方案要点为：以怀山药微型块茎为转化受体，通过农杆菌侵染，将目的基因导入怀山药受体，共培养后转入选择性固体分化培养基中诱导出抗性芽，再转入选择性生根培养基中诱导生根，最终获得怀山药转化植株，通过GUS组织化学染色和PCR的方法对转化植株进行鉴定，最终获得怀山药转基因植株。本发明的转化过程易操作且周期短，转化效率为2.5%。 | ||
| 搜索关键词： | 怀山药 遗传转化 转化植株 植物基因工程技术 技术方案要点 组织化学染色 转入 分化培养基 农杆菌侵染 生根培养基 转基因植株 目的基因 微型块茎 诱导生根 转化受体 转化效率 抗性芽 诱导 转化 | ||
【主权项】：
1.一种怀山药遗传转化的方法，其特征在于具体过程为：A.以怀山药微型块茎作为外植体进行转化和再生；B.将所述外植体与农杆菌转入共培养培养基中进行共培养，将携有目的基因的过表达载体pCAMBIA1301‑SERK及沉默载体pART27‑SERK分别导入怀山药受体；C.所述怀山药受体分别直接转入选择性固体分化培养基，诱导抗性芽；D.所述抗性芽分别转入选择性固体生根培养基，诱导生根，获得怀山药转化植株；E.借助GUS、PCR方法鉴别过表达转化植株，借助PCR方法鉴别沉默转化植株，最终获得转基因怀山药植株。
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