[发明专利]免疫细胞杀伤肿瘤能力的检测模型及其构建方法和应用

摘要

本发明提供了一种免疫细胞杀伤肿瘤能力的检测模型的构建方法，包括：(1)对受精后24‑96小时的斑马鱼胚胎拆卵膜后，将第一活细胞染色剂标记的肿瘤细胞注射到斑马鱼体内，然后在含黑色素抑制剂的培养水中培养，筛选出尾部可见第一活细胞染色剂标记的斑马鱼；(2)对收集到的斑马鱼麻醉后，分为免疫细胞注射组和对照组，以显微注射的方式向免疫细胞注射组注射第二活细胞染色剂标记的免疫细胞、向对照组注射载体溶液，然后置于含黑色素抑制剂的培养水中继续培养。该构建方法的周期短，省时、省力，建模成本低，构建的检测模型能准确客观地评价肿瘤免疫疗法的效果。本发明还提供了基于该方法制得的检测模型及其应用。

主权项

1.一种免疫细胞杀伤肿瘤能力的检测模型的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)取受精后24‑96小时的斑马鱼胚胎，对其拆卵膜后，采用麻醉剂麻醉，然后以显微注射的方式将第一活细胞染色剂标记的肿瘤细胞注射到斑马鱼的体内中，然后将斑马鱼置于含黑色素抑制剂的培养水中培养3‑6h，在荧光显微镜下观察、拍照，收集尾部可见所述第一活细胞染色剂标记的转移灶的斑马鱼；(2)提供第二活细胞染色剂标记的免疫细胞，将其重悬在载体液中，得到免疫细胞悬液；取步骤(1)中收集到的斑马鱼，将其麻醉后，分为免疫细胞注射组和对照组，以显微注射的方式向免疫细胞注射组注射所述免疫细胞悬液、向对照组注射等体积的载体液，然后置于含黑色素抑制剂的培养水中继续培养10‑15h；其中，所述载体液为无血清培养基、磷酸盐缓冲液或水。