[发明专利]一种建立昆虫细胞系的方法有效
| 申请号： | 201810390678.3 | 申请日： | 2018-04-27 |
| 公开（公告）号： | CN108588003B | 公开（公告）日： | 2020-06-26 |
| 发明（设计）人： | 张寰;唐凯;秦启联;张继红;孟茜;李瑄;李苗苗;于旭鹏 | 申请（专利权）人： | 中国科学院动物研究所 |
| 主分类号： | C12N5/07 | 分类号： | C12N5/07;C12R1/91 |
| 代理公司： | 北京泛华伟业知识产权代理有限公司 11280 | 代理人： | 李渤;郭广迅 |
| 地址： | 100101 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种建立昆虫细胞系的方法，所述方法包括以下步骤：1)在昆虫细胞培养液中培养昆虫组织，以获得分散的原代昆虫细胞；2)物理性低氧诱导或化学性低氧诱导步骤1)所获得的原代细胞；3)半量更换昆虫细胞培养液后，对步骤2)的原代细胞进行复氧，直至观察到细胞不断增殖布满整个瓶底；所述复氧条件为：在25‑28℃、复氧诱导10‑30天；4)传代培养步骤3)获得的细胞，获得能够连续传代的细胞，从而建立昆虫细胞系；整个过程都是在无菌条件下进行。与现有技术相比，本发明的方法显著提升了昆虫原代细胞建系成功率以及缩短了昆虫建系前所需的培养时间。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 建立 昆虫 细胞系 方法 | ||
【主权项】：
1.一种建立昆虫细胞系的方法，所述方法包括以下步骤：1)在昆虫细胞培养液中培养昆虫组织，以获得分散的原代昆虫细胞；2)物理性低氧诱导或化学性低氧诱导步骤1)所获得的原代细胞；所述物理性低氧诱导的条件为：25‑28℃，0.5‑10％的氧气浓度下诱导3‑15天；所述化学性低氧诱导的条件为：25‑28℃，诱导3h～48h；3)半量更换昆虫细胞培养液后，对步骤2)的原代细胞进行复氧，直至观察到细胞不断增殖布满整个瓶底；所述复氧条件为：在25‑28℃、通入空气诱导10‑30天；4)传代培养步骤3)获得的细胞，获得能够连续传代的细胞，从而建立昆虫细胞系；整个过程都是在无菌条件下进行。
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