[发明专利]针对人源ADRB2基因设计的四条sgRNA有效
| 申请号： | 201810382911.3 | 申请日： | 2018-04-26 |
| 公开（公告）号： | CN108546703B | 公开（公告）日： | 2021-04-13 |
| 发明（设计）人： | 施明;郑骏年;刘丹;孙毓 | 申请（专利权）人： | 徐州医科大学 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113 |
| 代理公司： | 北京预立生科知识产权代理有限公司 11736 | 代理人： | 李红伟;高倩倩 |
| 地址： | 221000 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明属于基因修饰技术领域，公开了针对人源ADRB2基因设计的四条sgRNA序列。登录网站检索人源ADRB2基因的CDS序列，根据sgRNA的设计原则，在其CDS区近5’端采取头对头的排列方式，设计了四条sgRNA。在此基础上，分别构建了单sgRNA表达质粒和多重sgRNA载体。经T7EN1酶切鉴定和TA克隆测序证实两种质粒转染HEK293T细胞后均可引导Cas9蛋白切割靶基因，特别是多重sgRNA其基因修饰的效率可高达100％。 | ||
| 搜索关键词： | 针对 adrb2 基因 设计 sgrna | ||
【主权项】：
1.针对人源ADRB2基因设计的四条sgRNA，其特征在于：过程包括登录UCSC Genome Browser Home网站检索人源ADRB2基因的CDS序列，依据sgRNA的设计原理在其外显子近5’端设计了四条sgRNA，分别命名为sgRNA1、sgRNA2、sgRNA3和sgRNA4，对应的核苷酸序列如下：sgRNA1：5’‑CCTGCGTGACGTCGTGGTC‑3’，sgRNA2：5’‑GTCATGTCTCTCATCGTCC‑3’，sgRNA3：5'‑ATCCACTGCGATCACGCAC‑3'，sgRNA4：5'‑AGCCTGCTGACCAAGAATA‑3'。
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