[发明专利]隧道磁场技术分离和富集外周血中稀有细胞的方法

摘要

本发明公开了一种利用隧道磁场技术分离和富集外周血中稀有细胞（胎儿有核红细胞、循环肿瘤细胞等）的方法，其步骤包括:（a）将包被目的稀有细胞特异性抗体或核酸适配体的磁珠加入样品外周血中孵育，使其形成细胞‑抗体或核酸适配体‑磁珠偶联物。目的细胞（胎儿有核红细胞、循环肿瘤细胞等)较其他血细胞携带的表面抗原数量更多或与核酸适配体的亲和力更强，从而结合更多数量的磁珠。（b）将抗体或核酸适配体磁珠孵育后的血液样品流过隧道磁场中的薄膜管，携带不同数量磁珠的细胞因其磁感应强度不同而停留在薄膜管壁的不同位置，从而达到稀有细胞（胎儿有核红细胞、循环肿瘤细胞等)分离的效果。（c）实施洗涤步骤，去除不携带磁珠的细胞。（d）可以在磁场保持下实施细胞的固定、染色和荧光标记；（e）向薄膜管施加负压使其形成薄膜片，固定分离后的细胞并封切两端，以便作细胞后续的鉴定分型（酶学、形态学和分子生物学检测等）。与现有技术相比，本方法简单、快速、稳定，自动化程度高，目的细胞丢失少，适用于科研与临床实验诊断。

主权项

1.一种利用隧道磁场技术分离和富集外周血稀有细胞（胎儿有核红细胞、循环肿瘤细胞等)的方法，其特征在于包括以下步骤:（a）将包被稀有细胞（胎儿有核红细胞、循环肿瘤细胞等)特异性抗体或核酸适配体的磁珠加入人体外周血中孵育，使外周血中的稀有细胞与磁珠结合;（b）将磁珠处理过的血液样品流过隧道磁场中的薄膜管，在磁场作用下，携带不同数量磁珠的细胞停留在薄膜管壁的不同位置，从而实现排序分离;（c）向薄膜管输入洗涤液，去除不携带磁珠的细胞;（d）向薄膜管施加负压使薄膜管收缩形成薄膜片，封切两端，固定并保存分离后的细胞，以便进行后续鉴定分型。