[发明专利]一种检测组蛋白乙酰转移酶活性的电化学法拉第笼免疫传感器的构建方法及应用

摘要

本发明公开了一种检测组蛋白乙酰转移酶活性的电化学法拉第笼免疫传感器的构建方法及应用，特点是包括以下步骤：(1)peptide/Au的制备：分别取乙酰转移酶p300与多肽、乙酰辅酶A在PBS(0.1M，pH 7.0)中充分混合，于恒温水浴锅中孵育。取催化反应液滴涂于金电极表面，4℃冰箱中孵育；(2)MBAuNPs@GO‑Ab的制备：将HAuCl4，CTAB与水混合，向反应混合物中加入抗坏血酸，然后加入NaOH，得到CTAB覆盖的AuNPs，离心、纯化后分散在等量水中，再向溶液中加入GO超声分散，静置备用，随后加入乙酰基抗体孵育，最后加入MB震荡混合均匀；(3)电化学法拉第笼免疫传感器的制备：取MBAuNPs@GO‑Ab滴涂于peptide/Au表面，室温下孵育，随后将制得的传感器置于PBS(0.1M，pH 7.0)中进行电化学SWV测试。

主权项

1.一种检测组蛋白乙酰转移酶活性的电化学法拉第笼免疫传感器的构建方法及应用，其特征在于该电化学免疫传感器通过以下方法构建的：首先，制备peptide/Au：分别取乙酰转移酶p300与多肽、乙酰辅酶A在PBS(0.1M，pH7.0)中充分混合，于恒温水浴锅中孵育。取催化反应液滴涂于金电极表面，4℃冰箱中孵育；其次，制备MB&AuNPs@GO‑Ab：将HAuCl4，CTAB与水混合，向反应混合物中加入抗坏血酸，然后加入NaOH，得到CTAB覆盖的AuNPs。离心、纯化后分散在等量水中，再向溶液中加入GO超声分散，静置备用，随后加入乙酰基抗体孵育，最后加入MB震荡混合均匀；(3)制备电化学法拉第笼免疫传感器：取MB&AuNPs@GO‑Ab滴涂于peptide/Au表面，室温下孵育，随后将制得的传感器置于PBS(0.1M，pH7.0)中进行电化学SWV测试。