[发明专利]一种微量、快速测定藻油含量的方法

摘要

本发明公开了一种微量、快速测定藻油含量的方法，所述方法包括：(1)取藻液，计算藻液中微藻细胞的数量浓度；(2)稀释得不同藻浓度的藻溶液；(3)配制母液；(4)上述每个藻浓度分别取2支试管，各加入5‑10mL藻液和5‑10ml1mol/L的HCl，充分混合后，每个藻浓度一支管加入0.1ul母液，另一支管加入步骤(3)中的有机溶剂，作为对照管，充分混匀；(5)使用激发波长400‑600nm激发光，在荧光显微镜下观察并拍照记录单细胞油脂积累变化情况；(6)计算油脂体积；(7)计算单位体积藻液油脂含量。采用本发明方法检测快速简单。本发明将微藻培养与检测方法融为一体，过程简单方便，即通过活体检测测定微藻油脂含量，需要时间较常规方法明显减少。

主权项

1.一种微量、快速测定藻油含量的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：(1)取进行微藻培养的藻液，计算藻液中微藻细胞的数量浓度C，C的单位为cell/ml；(2)称取0.5‑1.0g经脱盐分的湿藻样，加入50‑100ml蒸馏水，充分混合均匀，然后稀释成1/2、1/3、1/4、1/5、1/10的5个不同藻浓度的藻溶液；(3)称取0.4‑0.8g荧光染色亲脂性荧光染料粉末，溶于有机溶剂中，室温下放置4‑6天，期间经常摇动，让其充分溶解后过滤，配制成母液；(4)上述每个藻浓度分别取2支试管，各加入5‑10mL藻液和5‑10ml1mol/L的HCl，充分混合后，每个藻浓度一支管加入0.1ul母液，另一支管加入步骤(3)中的有机溶剂，作为对照管，充分混匀；(5)使用激发波长400‑600nm激发光，在荧光显微镜下观察并拍照记录单细胞油脂积累变化情况；(6)根据照片记录单细胞油滴颗粒数目，并测定油滴直径，按照球体积公式计算每个油滴体积，每个细胞油脂含量为所有油滴体积的加和；(7)根据微藻细胞的数量浓度C和单个细胞油脂含量计算单位体积藻液油脂含量：Vt＝CV，C为微藻细胞的数量浓度，V为单细胞油脂体积，Vt为单位体积油脂含量。