[发明专利]一种连续动态监测细胞容积调节的分析方法

摘要

本发明提供了一种连续动态监测细胞容积调节的分析方法。通过石英晶体微天平对传感界面上固定的细胞中水分子移动所引起频率和质量的变化进行监测，实现对细胞容积调节变化的在线追踪。该分析方法包括将待监测细胞固定于羧基功能化的QCM芯片，得到频率Δf1；通入工作液，读取细胞膨胀最大值频率Δf2，待细胞趋于回缩后逐渐稳定，读取频率Δf3，计算频率Δf2和频率Δf3的差值ΔF1；计算频率Δf2和频率Δf1的差值ΔF2；ΔF1/ΔF2≥10％即可判断细胞容积调节值，同时还可分析细胞是否发生或发生何种容积调节行为。本发明具有实时在线分析、连续动态监测、灵敏度高、操作简单、分析快速等优势，在临床分析和基础医学研究领域具有广阔的应用前景。

主权项

1.一种连续动态监测细胞容积调节的分析方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)对QCM芯片进行羧基功能化，得到羧基功能化的QCM芯片；(2)将步骤(1)得到羧基功能化的QCM芯片装入石英晶体微天平的反应器中，采用自动进样装置，向反应器中通入工作液₁，得到稳定的基线；(3)通入10³～10⁵个/mL的待监测细胞，待曲线趋势平稳后，通入所述的工作液₁冲洗掉未固定在QCM芯片上的细胞，读取石英晶体微天平监测到的频率Δf₁；(4)将工作液₂以0.1～5mL·min^‑1的流速通入反应器中，细胞迅速发生变化，读取石英晶体微天平监测到的变化最大值频率Δf₂，随后细胞逐渐稳定，读取趋于平稳的频率Δf₃；(5)计算及结果分析：计算频率Δf₂和频率Δf₃的差值ΔF₁；计算频率Δf₂和频率Δf₁的差值ΔF₂；求出ΔF₁与ΔF₂的比值，得到ΔF₁/ΔF₂即为细胞容积调节值，当Δf₂≠Δf₃时，5/Δf₂≥0.2判断细胞发生膨胀，5/Δf₃≥0.2判断细胞发生回缩，ΔF₁/ΔF₂≥10％表明细胞产生容积调节性减小，反之，‑5/Δf₂≥0.2判断细胞发生回缩，‑5/Δf₃≥0.2判断细胞发生膨胀，ΔF₁/ΔF₂≥10％则表明细胞产生容积调节性增加；当Δf₂＝Δf₃时，则表明细胞未发生细胞容积调节。