[发明专利]一种高表达β-甘露聚糖酶的毕赤酵母工程菌株及应用在审
申请号: | 201810124606.4 | 申请日: | 2018-02-07 |
公开(公告)号: | CN109536395A | 公开(公告)日: | 2019-03-29 |
发明(设计)人: | 刘建彤;余萍;彭楠;梁运祥;田建平 | 申请(专利权)人: | 四川润格生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N1/19 | 分类号: | C12N1/19;C12N9/24;C12R1/84 |
代理公司: | 武汉宇晨专利事务所 42001 | 代理人: | 龚莹莹 |
地址: | 618200 四川省绵阳市绵竹*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | 本发明公开了一种高表达β‑甘露聚糖酶的毕赤酵母工程菌株及应用,所述的工程菌为:毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115‑syn‑Man,保藏编号:CCTCC NO:M2017827。申请人将syn‑Man插入表达载体pPIC9K中获得pPIC9K‑syn‑Man,再优化载体中信号序列,同源重组等方法,提高syn‑Man序列在毕赤酵母中的拷贝数,用不同浓度的抗生素G418筛选含有高拷贝整合质粒的重组GS115菌株,最终筛选得到一株表达量稳定,抗性和酶活最高的菌株。通过50L发酵罐中高密度发酵,156h获得β‑甘露聚糖酶活达到最高值110000 U/mL,显示出良好的应用前景。 | ||
搜索关键词: | 甘露聚糖酶 毕赤酵母工程菌株 毕赤酵母 高表达 应用 表达载体pPIC9K 高密度发酵 保藏 同源重组 信号序列 整合质粒 表达量 高拷贝 工程菌 拷贝数 抗性 菌株 酶活 抗生素 发酵 筛选 优化 | ||
【主权项】:
1.一种高表达β‑甘露聚糖酶的毕赤酵母工程菌,所述的工程菌为:毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115‑syn‑Man,保藏编号:CCTCC NO:M2017827。
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