[发明专利]羊耳菊提取物中九种有效成分在Caco-2细胞模型中摄取和转运机制的研究方法在审

专利信息
申请号: 201810110804.5 申请日: 2018-02-05
公开(公告)号: CN109100432A 公开(公告)日: 2018-12-28
发明(设计)人: 巩仔鹏;兰燕宇;张楠;李梅;侯靖宇;胡贺佳;王永林;李月婷;陈思颖;李勇军;黄勇;郑林;王爱民;陆苑;刘亭;马雪;潘洁;孙佳 申请(专利权)人: 贵州医科大学
主分类号: G01N30/02 分类号: G01N30/02;G01N30/06
代理公司: 北京联瑞联丰知识产权代理事务所(普通合伙) 11411 代理人: 郑自群
地址: 550025*** 国省代码: 贵州;52
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摘要: 发明采用超高压液相色谱串联高分辨质谱仪(UHPLC‑Q‑TOF MS/MS),比较空白细胞液、细胞吸收样品和羊耳菊活性部位样品图谱,判断主要能进入细胞被吸收的成分,然后再利用Caco‑2细胞建立摄取转运模型,考察药物浓度、pH值、温度、P‑gp抑制剂等对羊耳菊活性部位中九种有效成分在细胞模型中摄取和转运的影响,进而确定羊耳菊活性部位中九种有效成分在Caco‑2细胞模型中的摄取和转运机制。
搜索关键词: 摄取 转运 活性部位 细胞模型 羊耳菊 超高压液相色谱 羊耳菊提取物 细胞建立 细胞吸收 样品图谱 高分辨 细胞液 抑制剂 再利用 质谱仪 串联 细胞 吸收 考察 研究
【主权项】:
1.羊耳菊提取物中九种有效成分在Caco‑2细胞模型中摄取和转运机制的研究方法,其特征在于,通过以下步骤实现:(1)首先制备羊耳菊提取物供试药液;并用九种有效成分配制标准对照液,用葛根素配制内标溶液;(2)建立Caco‑2细胞模型,将得到的的供试药加入Caco‑2细胞模型,采用超高压液相色谱串联高分辨质谱仪(UHPLC‑Q‑TOF MS/MS)对细胞摄取液中的成分进行分析,并通过与对照品进行比对,确认细胞摄取液中的可被吸收成分;(3)建立细胞吸收液、转运缓冲液等不同基质背景下,同时测定羊耳菊提取物中九种有效成分含量的超高效液相色谱‑串联质谱(UPLC‑MS)方法;(4)利用Caco‑2细胞建立摄取和转运模型,考察药物浓度、pH值、温度、P‑gp抑制剂等对羊耳菊提取物中九种有效成分在细胞模型摄取和转运的影响,进而确定羊耳菊提取物中九种有效成分在Caco‑2细胞模型中的摄取和转运机制。
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