[发明专利]一种高性能的高效液相-串联质谱分析方法

摘要

本发明公开了一种高性能的高效液相‑串联质谱分析方法，包括带有完整发射体尖端的25μm×100cm石英分析柱构建，步骤：从石英玻璃管一端移除一段距离的聚酰亚胺层；硅酸盐溶液经毛细管作用转移至裸漏窗长度的五分之四处；借助焊铁技术诱导高分子聚合，形成熔块；待过量的硅酸盐溶液喷出后，熔块用铸铁加热数秒；用装有氦气的不锈钢容器持续加压一段时间形成100cm的着床长度；将色谱柱烘干；将集成发射器尖头形成2‑4mm的熔块。本发明在LC‑MS/MS中表现了多重灵敏值；与state‑of‑the‑art质谱仪联用时，可提供深度的序列覆盖范围和高的数据产出率。

主权项

1.一种高性能的高效液相‑串联质谱分析方法，其特征在于，包括以下步骤：一、带有完整发射体尖端的25μm×100cm石英分析柱构建，基于硅酸盐的柱筛按以下方法原位浇铸：(1)从石英玻璃管一端移除一段距离的聚酰亚胺层；(2)硅酸盐溶液经毛细管作用转移至裸漏窗长度的五分之四处；(3)接下来，借助焊铁技术诱导高分子聚合，形成1‑2mm长的熔块；(4)待过量的硅酸盐溶液喷出后，熔块用400℃铸铁加热数秒；(5)色谱柱采用具有5Hm直径，孔大小，负载悬浮于乙腈溶液中的C18珠子；(6)用装有氦气的不锈钢容器持续在约1500psi下加压48h，形成100cm的着床长度，实现对溶液的包裹；(7)然后，用氦气将色谱柱烘干；(8)最后，利用激光依赖型微电极拉制器使直径0.75‑1.5μm的集成发射尖端形成2‑4mm的熔块；(9)准备POROS 10R2树脂包裹的150μm×6cm的色谱柱，并作为前置柱；二、测定色谱柱流速，按照以下方法：纳升级流速的液相色谱平台基于Waters NanoACQUITY UPLC系统，装有2位6端阀；将最初的2D RP‑RP结构的第一个维柱移除，形成一个一维液相‑质谱/质谱平台；自动进样器用于装入样品；分析柱的实际纳米级流速通过一个位于反相PC前端的被动流动裂缝实现；前置柱和分析柱装配在一个开口型几何体中；利用2个独立的方式来测定色谱柱流速，一种是：当喷压设定为>5kV时，色谱柱中周期性地产生泡沫，通过计算液流穿过预先确定的一段毛细管距离的时间来估算流速；一旦喷压减小到正常的运行水平，泡沫将实现快速冲洗；另一种是：借助一个25mm I.D.融合的石英毛细管空块来收集尖端流出物的体积，这一融合的石英毛细管由ESI源平台的二次夹夹住，并保持与发射器垂直，用前期报道的各类参数计算线性速度，并装配相似的几何液相色谱。