[发明专利]一种催化活性提高的菜豆环氧化物水解酶突变体有效

专利信息
申请号: 201810033882.X 申请日: 2018-01-15
公开(公告)号: CN108165538B 公开(公告)日: 2020-05-08
发明(设计)人: 邬敏辰;阚婷婷;王婷婷;苏永君;李剑芳 申请(专利权)人: 江南大学
主分类号: C12N9/14 分类号: C12N9/14;C12N15/55;C12N15/70;C12N1/21;C12P41/00;C12P17/02
代理公司: 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 代理人: 张勇
地址: 214122 江苏*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明公开了一种催化活性提高的菜豆环氧化物水解酶突变体,属于基因工程和蛋白质表达领域。本发明的突变体是在SEQ ID NO.2所示的氨基酸的基础上,将第106位的缬氨酸突变成了异亮氨酸。本发明摇瓶诱导10h得到的突变酶PvEH1V106I催化活性为234.75U/g,是野生型酶(157.15U/g)的1.49倍。
搜索关键词: 一种 催化 活性 提高 菜豆 环氧化物 水解 突变体
【主权项】:
1.一种菜豆环氧化物水解酶突变体,其特征在于,所述环氧化物水解酶突变体是:

(a)氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的蛋白质;

(b)在严格条件下与(a)限定的氨基酸序列杂交且编码具有环氧化物水解酶活性的氨基酸序列。

2.一种编码权利要求1所述的环氧化物水解酶突变体的基因,其特征在于,所述基因的核苷酸序列是SEQ ID NO.3所示的序列。

3.一种获得权利要求1所述的环氧化物水解酶突变体的方法,其特征在于,是在如SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列基础上,将第106位的缬氨酸突变成了异亮氨酸。

4.含有编码权利要求1所述突变体的基因的载体。

5.表达权利要求1所述突变体的基因工程菌。

6.根据权利要求5所述的基因工程菌,其特征在于,所述基因工程菌是以大肠杆菌、芽孢杆菌或者酵母菌为宿主构建得到的。

7.权利要求1所述突变体、编码权利要求1所述突变体的核苷酸片段、含有编码权利要求1所述突变体的基因的载体、表达权利要求1所述突变体的基因工程菌的应用。

8.根据权利要求7所述应用,其特征在于,所述应用是指在医药、农药、铁电液晶、香料、精细化学品工业中的应用。

9.根据权利要求7所述应用,其特征在于,所述应用是指在手性生物催化中的应用。

10.根据权利要求9所述应用,其特征在于,所述应用是以权利要求1所述突变体或表达权利要求1所述突变体的基因工程菌为催化剂,在磷酸盐缓冲液中催化外消旋邻甲基苯基缩水甘油醚。

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