[发明专利]一种开关型pH荧光探针及其制备方法和应用

摘要

本发明属于荧光探针制备技术领域，提供了一种开关型pH荧光探针及其制备方法和应用，以酸性品红为碳源，加入无水乙醇，均匀混合得到澄清的无色溶液；加入不锈钢反应釜中并密封，置于高温烘箱中反应，得到深棕色醇溶液；深棕色醇溶液通过旋转蒸发去除乙醇，得到黑色粘稠物，二次水溶解得到棕黑色水溶液；透析去除杂质，即得到纯净的氮硫共掺杂碳量子点水溶液；冷冻干燥后得到目标碳量子点，即开关型pH荧光探针。本发明工艺简单，原料来源广泛且价格便宜，制备条件要求低，所得探针量子产率较高。制得的pH荧光探针可在活细胞荧光成像中应用，也可用作活细胞pH实时监测。

主权项

1.一种开关型pH荧光探针的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：

1）、将酸性品红和无水乙醇置于玻璃容器中，搅拌混合均匀，得到澄清的无色溶液，酸性品红和无水乙醇的比例为：0.05‑1.0：4‑100g/ml；

2）、将玻璃容器中的无色溶液转移到聚四氟乙烯内胆中，将内胆密闭好后，置于不锈钢反应釜中，将反应釜置于高温烘箱中反应，得到深棕色醇溶液；

3）、将深棕色醇溶液置于旋转蒸发仪中，蒸发去除深棕色醇溶液中的乙醇，得到黑色粘稠物，利用二次水溶解粘稠物，得到棕黑色水溶液；

4）、将棕黑色水溶液通过1000Da的透析袋，在玻璃容器中透析处理至少3天，即得到纯净的氮硫共掺杂碳量子点水溶液；

5）、将获得的氮硫共掺杂碳量子点水溶液冷冻干燥后得到目标碳量子点，即开关型pH荧光探针。

2.根据权利要求1所述的一种开关型pH荧光探针的制备方法，其特征在于：步骤2）中所述的反应温度为250℃，反应时间为9‑14h。

3.根据权利要求1所述的一种开关型pH荧光探针的制备方法，其特征在于：步骤2）中所述的聚四氟乙烯内胆的体积为25ml，50ml，100ml，150ml，200ml或250ml。

4.根据权利要求1所述的一种开关型pH荧光探针的制备方法，其特征在于：步骤3）中控制旋转蒸发仪温度为65‑75℃。

5.利用权利要求1至4任一所述的一种开关型pH荧光探针的制备方法制备的开关型pH荧光探针。

6.根据权利要求5所述的利用开关型pH荧光探针的制备方法制备的开关型pH荧光探针，其特征在于：所述开关型pH荧光探针发出黄色荧光，荧光量子效率为9.8‑14.6%。

7.根据权利要求5所述的利用开关型pH荧光探针的制备方法制备的开关型pH荧光探针，其特征在于：所述开关型pH荧光探针在活细胞荧光成像中的应用。

8.根据权利要求5所述的利用开关型pH荧光探针的制备方法制备的开关型pH荧光探针，其特征在于：所述开关型pH荧光探针在活细胞内实时监测pH的应用。

9.根据权利要求8所述的利用开关型pH荧光探针的制备方法制备的开关型pH荧光探针，其特征在于：所述开关型pH荧光探针在活细胞中实时监测pH，pH检测线性范围为5.0‑7.4。