[发明专利]热稳定的Cas9核酸酶在审
| 申请号： | 201780086540.8 | 申请日： | 2017-08-16 |
| 公开（公告）号： | CN110382693A | 公开（公告）日： | 2019-10-25 |
| 发明（设计）人： | 约翰·万德奥斯特;理查德·范克拉嫩堡;艾勒克·芬纳·博斯马;扬尼斯·莫加科斯;普拉塔纳·莫汉拉朱 | 申请（专利权）人： | 瓦赫宁根大学;科学技术基金会 |
| 主分类号： | C12N9/22 | 分类号： | C12N9/22;C12N15/113 |
| 代理公司： | 北京安信方达知识产权代理有限公司 11262 | 代理人： | 李敏春;郑霞 |
| 地址： | 荷兰瓦*** | 国省代码： | 荷兰;NL |
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| 摘要： | 热稳定的Cas9核酸酶。本发明涉及遗传工程领域，并且更特别地涉及核酸编辑和基因组修饰。本发明提供了一种分离的Cas蛋白或其多肽片段，所述分离的Cas蛋白或其多肽片段具有SEQ ID NO:1的氨基酸序列或与SEQ ID NO:1具有至少77％同一性的序列。Cas蛋白或多肽能够在20℃和100℃的范围中(包括端点)的温度结合、裂解、标记或修饰双链靶多核苷酸。本发明还提供了编码所述Cas9核酸酶的分离的核酸分子、表达载体和宿主细胞。本发明还提供了被Cas蛋白或多肽识别的PAM序列。本文所公开的Cas9核酸酶提供了通常用于(特别是，在升高的温度)进行遗传工程的新型工具，并且在嗜热生物体(特别地，微生物)的遗传操作中具有特别的价值。 | ||
| 搜索关键词： | 核酸酶 蛋白 多肽片段 热稳定 多肽 双链靶多核苷酸 遗传工程领域 氨基酸序列 基因组修饰 生物体 表达载体 核酸分子 宿主细胞 新型工具 遗传操作 同一性 核酸 裂解 修饰 微生物 升高 | ||
【主权项】：
1.至少一种靶向RNA分子和Cas蛋白用于结合、裂解、标记或修饰包含靶核酸序列的双链靶多核苷酸的用途，其中：所述双链靶多核苷酸包含靶核酸链和非靶核酸链，所述靶核酸链包含所述靶核酸序列，所述非靶核酸链包含与所述靶核酸序列互补的前间区核酸序列；所述Cas蛋白具有SEQ ID NO:1的氨基酸序列或与SEQ ID NO:1具有至少77％同一性的序列；所述至少一种靶向RNA分子识别所述靶序列；所述非靶核酸链还包含与所述前间区核酸序列的3’末端直接地相邻的前间区相邻基序(PAM)序列，其中所述PAM序列包含5’‑NNNNCNN‑3’；并且其中所述用途不是在人类细胞中。
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