[发明专利]一种敲除转基因植物中潮霉素抗性基因的方法在审
| 申请号： | 201711472842.7 | 申请日： | 2017-12-29 |
| 公开（公告）号： | CN108220329A | 公开（公告）日： | 2018-06-29 |
| 发明（设计）人： | 陈克贵;彭梅芳;范晓丽 | 申请（专利权）人： | 四川省农业科学院生物技术核技术研究所;成都亿农农业科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;A01H5/00;A01H6/46 |
| 代理公司： | 成都行之专利代理事务所(普通合伙) 51220 | 代理人： | 廖慧敏 |
| 地址： | 610000*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种敲除转基因植物中潮霉素抗性基因的方法，解决了现有转基因植物普遍存在的选择标记基因潮霉素抗性基因的去除问题。从而在技术上解决了再次转基因选择标记基因难找的问题，而且在农业生产上，也排除了潮霉素抗性基因存在于转基因农作物中不利于人体健康的问题、以及潮霉素抗性基因植物对生态环境存在潜在危害的问题。本发明利用CRISPR/Cas9技术原理构建潮霉素基因编辑载体，载体质粒通过农杆菌介导的方法转化植物。依转化植株的不同，获得的转基因植株通过杂交或/和自交后，筛选得到潮霉素抗性基因敲除、并且不含有用于编辑潮霉素抗性基因所转入植株的Cas9基因等外源DNA的植株。 | ||
| 搜索关键词： | 潮霉素抗性基因 转基因植物 敲除 选择标记基因 植株 转基因农作物 潮霉素基因 农杆菌介导 转基因植株 技术原理 农业生产 人体健康 生态环境 载体质粒 转化植物 转化植株 转基因 源DNA 构建 自交 去除 杂交 转入 筛选 基因 | ||
【主权项】：
1.一种敲除转基因植物中潮霉素抗性基因的方法，其特征在于，包括：1)、根据潮霉素抗性基因DNA序列，设计并构建一个或多个sgRNA表达盒；2)、将一个或多个sgRNA表达盒克隆到编辑载体上；3)、将克隆得到的编辑载体转入农杆菌中；4)、采用农杆菌介导的方法转化植株，通过植株的杂交或/和自交后，筛选获得潮霉素抗性基因敲除、并且不含用于编辑潮霉素抗性基因所转入植株的外源DNA的植株。
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