[发明专利]一种粉叶金花组织培养快速繁殖方法

摘要

本发明公开了一种粉叶金花的组织培养快速繁殖方法，其采用具有优良性状母株当年萌发带有叶芽的茎段作为外植体，经过清洗、灭菌后接种于不定芽诱导培养基中培养，经过20‑30天的不定芽诱导培养后，将不定芽转接于增殖培养基中进增殖培养，经过35‑40d的培养后增殖倍率可以达到4‑5倍。最后将增殖后的芽体分株接种于生根壮苗培养基中进行生根壮苗诱导培养，经过60天的壮苗培养生根率可达到100%。本发明可以在一个周期120‑130天内使粉叶金花幼苗扩大4‑5倍，较传统的扦插繁殖时间缩短一半以上，且不受季节、气候及用地方面的条件限制，且苗木质量优良，数量充足，可以快速满足市场对园林造景绿化的需求。

主权项

1.一种粉叶金花组织培养快速繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤：/n步骤A、不定芽诱导：采取健壮粉叶金花当年生带有腋芽的茎段作为外植体，先对外植体进行清洗、消毒，接入不定芽诱导培养基中培养，光照强度1500-2000Lux，光照时间10h/d，温度23±2℃，培养20-30天；/n步骤B、增殖培养：将步骤A诱导出的不定芽切下后，接入增殖培养基中进增殖培养，培养条件为温度为23±2℃，光照10h/d，培养周期35-40天；/n步骤C、壮苗生根培养：将步骤B增殖后的芽体分株切下，然后接种于壮苗生根培养基中，培养周期60天；/n其中，步骤A中外植体的清洗、消毒方法为：将采集的幼嫩枝条用家用清水清洗后用洗衣粉饱和澄清液浸泡12h，冲洗干净后转移至超净工作台中用75％的酒精溶液清洗10s，清洗过程中轻微摇晃使外植体充分与酒精溶液接触，然后用无菌蒸馏水冲洗5遍，再用10％次氯酸钠溶液清洗8min，无菌蒸馏水冲洗3遍，最后用0.1％升汞溶液再清洗8min，无菌蒸馏水冲洗5遍，沥干水分备用；/n步骤A中，所述不定芽诱导培养基中含改良后的MS基本培养基，植物激素6-BA0.8-1.0mg/L、NAA0.1-0.3mg/L、蔗糖30g/L，PH5.6-5.8；/n步骤B中，所述增殖培养基中含有改良后的MS基本培养基，激素水平为6-BA 0.3-0.5mg/L、NAA 0.1-0.3mg/L、蔗糖20g/L，PH5.6-5.8；/n步骤C中，壮苗生根培养基中含有改良后的MS基本培养基，激素水平ABT 0.1-0.3mg/L、香蕉50g/L、AG1g/L，PH5.6-5.8；/n所述改良后的MS基本培养基包括：大量元素：硝酸铵1375mg/L、硝酸钾1650mg/L、七水硫酸镁370mg/L、磷酸二氢钾170mg/L、氯化钙170mg/L、四水硝酸钙170mg/L；微量元素：碘化钾0.83mg/L，硼酸0.62mg/L，硫酸锰22.3mg/L，硫酸锌8.6mg/L，钼酸钠0.25mg/L，硫酸铜0.025mg/L，氯化钴0.025mg/L；铁盐：乙二胺四乙酸二钠37.3mg/L，硫酸亚铁27.8mg/L；有机成分：肌醇100mg/L，甘氨酸2mg/L，盐酸硫胺素1mg/L，盐酸吡哆醇0.5mg/L，烟酸0.5mg/L，L-抗坏血酸25mg/L。/n