[发明专利]一种血清淀粉样蛋白A检测试剂盒及其制备、使用方法

摘要

本发明涉及血清血清淀粉样蛋白A检测技术领域，特别涉及一种血清淀粉样蛋白A检测试剂盒及其制备、使用方法，试剂R1中含有缓冲液，γ‑Fe2O3/聚噻吩(γ‑Fe2O3‑PTP)复合纳米颗粒，AMPHITOL 55AB（耶油酰胺丙基甜菜碱），防腐剂；试剂R2中含有缓冲液，羊抗人血清淀粉样蛋白A抗体包被胶乳颗粒，酪蛋白，明胶，海藻糖，PEG‑6000，AMPHITOL 55AB（耶油酰胺丙基甜菜碱），防腐剂；本发明显著改善了试剂的稳定性，显著增强了试剂的灵敏度和准确度。 1

主权项

1.一种血清淀粉样蛋白A检测试剂盒，其特征在于：其包括试剂R1和试剂R2，

所述试剂R1包括如下含量的组分：

缓冲液                                              50mmol/L，

γ‑Fe₂O₃/聚噻吩复合纳米颗粒                          1.5%~2.5%（W/V），

耶油酰胺丙基甜菜碱                                  0.5g/L，

防腐剂                                              0.1mL/L；

所述试剂R2包括如下含量的组分：

缓冲液                                              60mmol/L，

羊抗人血清淀粉样蛋白A抗体包被胶乳颗粒               0.15%~0.25%（W/V）

酪蛋白                                              0.5g/L

明胶                                                0.1g/L，

海藻糖                                              15~25g/L，

PEG‑6000                                            6~12g/L，

耶油酰胺丙基甜菜碱                                  0.5g/L，

防腐剂                                              0.1mL/L。

2.根据权利要求1所述的血清淀粉样蛋白A检测试剂盒，其特征在于：试剂R1中缓冲液为25℃，pH为7.0的DIPSO缓冲液；试剂R2中缓冲液为25℃，pH为7.5的DIPSO缓冲液。

3.根据权利要求1所述的血清淀粉样蛋白A检测试剂盒，其特征在于：所述复合纳米颗粒γ‑Fe₂O₃/聚噻吩(γ‑Fe₂O₃‑PTP)，粒径25‑40nm。

4.根据权利要求1所述的血清淀粉样蛋白A检测试剂盒，其特征在于：所述防腐剂为Proclin 300。

5.根据权利要求1‑4任意一项所述的血清淀粉样蛋白A检测试剂盒的制备方法，其特征在于：γ‑Fe₂O₃/聚噻吩复合纳米颗粒的制备方法为：取γ‑Fe₂O₃纳米颗粒加入到聚乙二醇400中，搅拌均匀后，使γ‑Fe₂O₃纳米颗粒表面包裹一层PEG400；然后，加入氯仿，利用超声分散，接着倒入烧瓶；此时，向烧瓶内加入噻吩，冰浴，机械搅拌；再加人无水FeCl₃，搅拌使反应完全，最后加入1mol/L的HCl，除去过量的无水FeCl₃，抽滤、洗涤、真空干燥，即可得到γ‑Fe₂O₃/聚噻吩。

6.根据权利要求5所述的血清淀粉样蛋白A检测试剂盒的制备方法，其特征在于：羊抗人血清淀粉样蛋白A抗体包被胶乳颗粒的制备方法为：取表面羧基化的聚苯乙烯胶乳颗粒，加入pH为6.2的MES缓冲液10ml，终浓度为1% ；然后加入羊抗人血清淀粉样蛋白A抗体及EDC，室温下搅拌反应4小时，18000 rpm离心20分钟，去除上清，所得沉淀即为羊抗人血清淀粉样蛋白A抗体包被胶乳颗粒。

7.根据权利要求1‑4任意一项所述的血清淀粉样蛋白A检测试剂盒的使用方法，其特征在于：使用全自动生化分析仪利用终点法进行测定，检测主波长为570nm，R1试剂和R2试剂的比例为3:1。