[发明专利]一种用于预测甜玉米中葡萄糖和果糖含量的NIRS模型构建方法

摘要

本发明公开了一种用于预测甜玉米中葡萄糖和果糖含量的NIRS模型构建方法，其包括如下步骤：1)样品近红外光谱的收集：获取其近红外光谱信息；2)酶法样液的制备；3)样品果糖和葡萄糖的测定：得样品化学值；4)NIRS建模：对葡萄糖含量的定标模型和果糖含量的定标模型进行光谱的散射校正和数学处理。本发明针对甜玉米中葡萄糖和果糖含量采用红外光谱分析结合酶法测定的化学值，通过光谱的散射校正和数学处理，对全光谱波段进行了化学计量学的分析统计，构建起葡萄糖和果糖含量的NIRS模型，其可用于快速预测甜玉米中葡萄糖和果糖的含量，进而为加快甜玉米优质种质资源筛选与品质育种提供有价值的参考。

主权项

1.一种用于预测甜玉米中葡萄糖和果糖含量的NIRS模型构建方法，其特征在于，包括如下步骤：1)样品近红外光谱的收集：通过系谱法选育后选取品种不同且具有代表性的甜玉米完整籽粒120～400份作为样品，对样品进行扫描并获取其近红外光谱信息；2)酶法样液的制备：甜玉米样品磨碎过60目筛，准确称取0.5g干样粉末放入10mL离心管中，加入4.5mL的超纯水，利用混匀仪震荡30min，再5000r/min离心处理30min，取3mL上清液于10mL离心管并加入7mL超纯水充分混匀，后准确量取0.1mL加入2.9mL超纯水稀释，该稀释液作为酶法样液；3)样品果糖和葡萄糖的测定：10mm石英比色皿中加入100μL步骤2)所得酶法样液，其中空白样以100μL超纯水代替100μL酶法样液，再分别加入2100μL蒸馏水、100μL咪唑缓冲液及100μL的NADP+和ATP混合溶液到比色皿中，轻轻混合有盖比色皿，放置3min，于紫外可见分光光度计的340nm处读取吸光度A1，然后加入20μL的己糖激酶和葡萄糖脱氢酶悬浮液至比色皿，轻轻混合，室温下放置5min，于紫外可见分光光度计的340nm处读取吸光度A2，而后再加入20μL的磷酸葡萄糖异构酶悬浮液到比色皿中，轻轻混合，室温放10min，于紫外可见分光光度计的340nm读取吸光度A3，根据K‑SUFRG_CALC数据处理方法计算出各样品中葡萄糖和果糖含量，作为样品化学值；4)NIRS建模：根据步骤3)所得样品化学值和步骤1)所得样品近红外光谱信息，将各样品分为定标集和验证集，定标集采用MPLS方法建立定标模型，验证集合用于验证所建模型的可信度，对定标模型进行光谱的散射校正和数学处理，其中对葡萄糖含量的定标模型采用加权多元散射校正方式结合1阶导数进行数学处理，得葡萄糖含量定标模型，对果糖含量的定标模型采用标准正常化及去散射处理结合数学组合为2,6,6进行数学处理，得果糖含量定标模型。