[发明专利]液相色谱串联质谱同步测定河流沉积物中4类抗生素的方法

摘要

本发明涉及一种液相色谱串联质谱同步测定河流沉积物中4类抗生素的方法，包括步骤1、实验器皿准备；步骤2、含水率测定；步骤3、冷冻真空干燥；步骤4、分级提取研磨过筛；步骤5、超声提取与机械振动制备；步骤6、双柱串联固相萃取在固相萃。前，向旋蒸后的提取液加入缓冲液，再用超纯水稀释充分摇匀；步骤7、提取液净化洗脱；步骤8、浓缩定容；步骤9、进行高效液相色谱串联质谱同步上机测定。该方法大大提高了净化和富集效果，以0.2％甲酸‑2mmol/L乙酸铵，pH 3的柠檬酸缓冲液与乙腈作为固体样品的提取液，取用最优条件配置组合，使目标分析物得到更好分离，色谱峰面积更大，回收率更好。

主权项

一种液相色谱串联质谱同步测定河流沉积物中4类抗生素的方法，其特征在于其特征在于：具体包括以下步骤：步骤1、实验器皿准备：实验开始前，非定量玻璃器皿在使用前经过马弗炉450℃高温持续烘烧4小时，充分除去残留在玻璃器皿上有机物；对定量的玻璃器皿需先用有机洗涤液超声清洁1～2小时，用超纯水洗净后，接着依次用甲醇、用甲醇和丙酮等有机溶剂分别冲洗3～5次；步骤2、含水率测定：称取5～10g同一批次的河流沉积物样品，在105～110℃烘4小时后放在干燥器中冷却至室温，称重测定含水率；步骤3、冷冻真空干燥：把冷冻、真空和干燥后的河流沉积物样品，在低温及真空环境中干燥16h以上，把冷冻凝结在河流沉积物样品中的水分直接以升华为水蒸气的方式排出去，最大程度保持目标物在河流沉积物中的含量；步骤4、分级提取研磨过筛：将经过步骤3处理后的河流沉积物样品充分混合均匀后，堆积在干净平整的纸上，取适量磨细后过60目网筛；步骤5、超声提取与机械振动制备：使用电子天平准确称取2.0g经步骤4过筛后的沉积物样品，置于玻璃离心管中并加入浓度为100ng/mL的混合内标液100uL充分摇匀；待溶剂挥发完全后，置于‑4℃的冷库中平衡避光过夜，等待24h后进行超声萃取；步骤6、双柱串联固相萃取：在固相萃取之前，向旋蒸后的提取液加入缓冲液，再用超纯水稀释充分摇匀；步骤7、提取液净化洗脱：待提取液全部通过双柱后，移除SAX柱，向HLB柱加入10ml超纯水，缓缓清洗残留在柱里的乙二胺四乙酸四，此时固相萃取装置仍保持开启状态，直至抽干残留在HLB柱的水份；步骤8、浓缩定容：保持氮吹系统气源充足，随后将洗脱液缓慢浓缩至近干，用1ml甲醇准确定容后，涡旋混匀，然后取0.22um有机相滤膜过滤于2ml棕色进样小瓶中，在‑18℃下避光保存待检；上机前取100ul，氮气吹干，再用甲醇：5mM草酸定容到100ul；步骤9、进行高效液相色谱串联质谱同步上机测定。