[发明专利]一种高山杜鹃外植体的剥芽消毒方法

摘要

本发明公开一种高山杜鹃外植体的剥芽消毒方法。该方法主要包括：去掉预取芽枝条顶部叶芽、花芽，促进其枝条顶部叶芽、叶柄处侧芽萌发；待枝条在其母株上生长10～30天，顶部叶芽、叶柄处侧芽萌发后，但叶片并未完全展开时，取其叶芽、侧芽进行消毒，在消毒前后各进行一次剥芽处理，即剥去苞片、芽体由外到内的1～2层叶片即为剥芽消毒的外植体。所得剥芽消毒的外植体，其组培污染率不高于30％，芽诱导成活率高于63％，打破了体表密被绒毛和/或腺体的一类高山杜鹃，其植株再生体系建立过程中外植体消毒困难的技术瓶颈，加快了这类高山杜鹃植株再生体系建立的速度，为杜鹃花基础研究、种苗工厂化生产及珍稀濒危种类的保护提供技术支撑。

主权项

1.一种高山杜鹃外植体的剥芽消毒方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)取芽枝条的预处理4～5月或7～8月，选择生长健壮，侧芽饱满的高山杜鹃枝条，保留其在母株上生长，仅去所选枝条顶部叶芽和/或所选枝条顶部花芽；(2)取芽及第一次剥芽待步骤(1)经预处理后的枝条在其母株上生长10～30天，且该枝条顶部叶芽和/或叶柄处侧芽萌发，但叶片未完全展开时，将该枝条上顶部萌发的叶芽和/或叶柄处萌发的侧芽取下，剥去叶芽和/或侧芽的苞片之后，再剥去由外到内的两层叶片得到芽体；(3)芽体消毒将芽体，用0.25％洗衣粉水振荡清洗，之后清水漂洗干净芽体表面洗衣粉水后，用2％次氯酸钠溶液浸泡消毒6～8min，再用0.1％氯化汞溶液浸泡消毒8～12min，取出芽体，用无菌水将残留的溶液清洗干净；(4)第二次剥芽芽体在超净工作台上，剥去其由外到内1～2层叶片，切去芽体基部0.2～0.5mm茎段得到剥芽消毒的高山杜鹃外植体；所述高山杜鹃是茎及叶片密被绒毛或/和腺体的高山杜鹃。