[发明专利]一种大鼠骨髓巨噬细胞分离及培养方法在审

专利信息
申请号: 201710789752.4 申请日: 2017-09-05
公开(公告)号: CN109423479A 公开(公告)日: 2019-03-05
发明(设计)人: 不公告发明人 申请(专利权)人: 江苏齐氏生物科技有限公司
主分类号: C12N5/0786 分类号: C12N5/0786
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 214434 江苏省无锡市江阴市东*** 国省代码: 江苏;32
权利要求书: 暂无信息 说明书: 暂无信息
摘要: 发明提供一种大鼠骨髓巨噬细胞分离及培养方法,包括步骤:(a)腹腔注射戊巴比妥钠处死大鼠,剪刀取下大鼠的双下肢股骨,去除毛皮后及多余的肌肉,将剥除肌肉后的股骨置于酒精中浸泡消毒;(b)冲洗髓腔收集骨髓悬液,连续筛网过滤,Ficoll分离,离心获取细胞沉淀;(c)完全培养基I重悬细胞沉淀,接种,差速贴壁法结合半量换液的方法更换完全培养基II获得骨髓源巨噬细胞。本发明提供了一种简单、高效、稳定的分离纯度及存活率高的骨髓巨噬细胞的方法。
搜索关键词: 大鼠 骨髓巨噬细胞 完全培养基 细胞沉淀 股骨 骨髓 肌肉 差速贴壁法 戊巴比妥钠 半量换液 分离纯度 腹腔注射 浸泡消毒 巨噬细胞 筛网过滤 存活率 毛皮 剥除 取下 髓腔 悬液 重悬 去除 下肢 冲洗 剪刀 接种 酒精
【主权项】:
1.一种大鼠骨髓巨噬细胞分离及培养方法,其特征在于,包括步骤:(a)腹腔注射戊巴比妥钠处死大鼠,剪刀取下大鼠的双下肢股骨,去除毛皮后及多余的肌肉,将剥除肌肉后的股骨置于酒精中浸泡消毒;(b)冲洗髓腔收集骨髓悬液,连续筛网过滤,Ficoll分离,离心获取细胞沉淀;(c)完全培养基I重悬细胞沉淀,接种,差速贴壁法结合半量换液的方法更换完全培养基II获得骨髓源巨噬细胞。
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