[发明专利]一种利用CTAB筛选产生物表面活性剂菌株的方法在审

专利信息
申请号: 201710758251.X 申请日: 2017-08-29
公开(公告)号: CN109423454A 公开(公告)日: 2019-03-05
发明(设计)人: 齐义彬;吕成远;伦增珉;王海涛;马涛 申请(专利权)人: 中国石油化工股份有限公司;中国石油化工股份有限公司石油勘探开发研究院
主分类号: C12N1/20 分类号: C12N1/20;C12N1/02
代理公司: 北京思创毕升专利事务所 11218 代理人: 孙向民;廉莉莉
地址: 100728 北*** 国省代码: 北京;11
权利要求书: 暂无信息 说明书: 暂无信息
摘要: 发明属于石油微生物技术领域,具体涉及一种利用CTAB筛选产生物表面活性剂菌株的方法。该方法包括以下步骤:(1)取样:选取含菌水样;(2)富集培养:将产生物表面活性剂激活剂与含菌水样混合、密封,并震荡培养,得到富集菌液;(3)CTAB平板分离:将富集菌液进行稀释,涂布到含有CTAB的平板上培养,直到平板上产生深蓝色晕圈的菌落;选取CTAB平板上深蓝色晕圈内的单一菌落,接种到培养基中震荡培养;(4)菌株复筛和能力测定:筛选出备选高产生物表面活性剂菌株;(5)稳定性验证:获得高产生物表面活性剂菌株。本发明提供的分离和筛选方法是一种高效的产生物表面活性剂的筛选方法。
搜索关键词: 生物表面活性剂 菌株 筛选 富集菌液 震荡培养 深蓝色 菌落 水样 晕圈 石油微生物 稳定性验证 富集培养 获得高产 能力测定 平板分离 培养基 激活剂 备选 复筛 取样 稀释 接种 密封 高产
【主权项】:
1.一种利用CTAB筛选产生物表面活性剂菌株的方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:(1)取样:选取含菌水样,所述含菌水样含有产生物表面活性剂的菌株;(2)富集培养:将产生物表面活性剂激活剂与含菌水样混合、密封,并震荡培养,得到富集菌液;(3)CTAB平板分离:将富集菌液进行稀释,涂布到含有CTAB的平板上培养,直到平板上产生深蓝色晕圈的菌落;选取CTAB平板上深蓝色晕圈内的单一菌落,接种到培养基中震荡培养;(4)菌株复筛和能力测定:将步骤(3)分离得到的菌株接种于产生物表面活性剂培养基中,震荡培养,得到菌株发酵液,测定发酵液的界面张力、临界稀释表面张力和排油圈;选择发酵液的界面张力小于0.5mN/m、发酵液稀释500倍后表面张力小于50mN/m、发酵液稀释10倍后排油圈大于5cm的菌株为备选高产生物表面活性剂菌株;(5)稳定性验证:将备选高产生物表面活性剂菌株按照步骤(4)的方法进行至少一轮摇瓶发酵验证,选择发酵液性能稳定的菌株,确定为高产生物表面活性剂菌株。
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