[发明专利]一种检测丙溴磷的时间分辨荧光试纸条及其应用

摘要

本发明公开了一种检测丙溴磷的时间分辨荧光试纸条及其应用。试纸条包括样品吸收垫、反应膜以及吸水垫，反应膜位于中间，样品吸收垫与吸水垫分别搭接于反应膜左右两端；样品吸收垫上设有加样区和微球区，微球区上载有丙溴磷时间时间分辨荧光微球；反应膜上设有检测线(T线)和质控线(C线)，T线接上包被丙溴磷抗原(包被原)，C线包被抗兔抗体。本发明还提供了一种应用上述丙溴磷试纸条检测苹果、玉米、黄瓜、西红柿、萝卜叶、白菜等样品中丙溴磷残留的方法。本发明所提供的试纸条具有操作简单、灵敏度高、定量检测、快速检测、成本低等特点，适合大量样本的筛查和现场监控。

主权项

一种检测丙溴磷的时间分辨荧光试纸条，包括样品吸收垫、反应膜以及吸水垫，其特征在于所述反应膜位于中间，样品吸收垫与吸水垫分别搭接于反应膜左右两端；所述样品吸收垫上设有加样区和微球区，微球区上载有丙溴磷时间时间分辨荧光微球；所述反应膜上设有检测线(T线)和质控线(C线)，T线接上包被丙溴磷抗原(包被原)，C线包被抗兔抗体，所述丙溴磷抗原是丙溴磷半抗原‑载体蛋白偶联物，所述丙溴磷半抗原的制备方法如下：(1)将20ml无水乙醇倒入单口瓶中，搅拌，≤0℃，缓慢滴加5g三氯硫磷，反应30min，加入20ml水，移入分液漏斗，萃取，分层；取下层有机相，无水硫酸钠干燥，备用；(2)将20ml无水乙醇倒入单口瓶中，搅拌，≤0℃，加入氢氧化钾5.6g，滴加步骤一的产物15g，反应30min，加入20ml水，移入分液漏斗，萃取，分层，取下层有机相，无水硫酸钠干燥，备用；(3)将20ml无水乙醇倒入单口瓶中，搅拌，≤0℃，加入氢氧化钾5.6g，4‑溴‑2氯苯酚20g，搅拌溶解后，滴加步骤二的产物18g，反应5h；加入20ml水，移入分液漏斗，分层，乙酸乙酯萃取，干燥；蒸干溶剂，柱层析纯化，得到27.1g目标物，收率76％；(4)于单口瓶中倒入20ml DMF，加入硫氢化钾7.2g，室温搅拌，加入步骤三的产物30g；缓慢升高温度至60度，反应10h；加入20ml水，移入分液漏斗，乙酸乙酯萃取，干燥，蒸干溶剂，柱层析纯化，得到29.6g目标物，收率77％；(5)于单口瓶中倒入20ml DMF，加入38g步骤四的产物，加入碳酸钾13.8g，加入溴丙酸叔丁酯22g，室温搅拌，缓慢升温至60度，反应20h，降温，加入20ml水，移入分液漏斗，乙酸乙酯萃取；干燥，蒸干溶剂，柱层析纯化，得到37.6g目标物，收率82％；(6)将步骤五的产物4.58g倒入20ml TFA中，室温搅拌2h，得目标物3.65g，收率91％。