[发明专利]一种高效提取甘蔗糖制品DNA的试剂盒和方法有效
| 申请号： | 201710679544.9 | 申请日： | 2017-08-10 |
| 公开（公告）号： | CN107267502B | 公开（公告）日： | 2020-12-11 |
| 发明（设计）人： | 曾巧英;凌秋平;齐永文;刘睿;吴嘉云;胡斐 | 申请（专利权）人： | 广东省科学院生物工程研究所 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人： | 苏运贞 |
| 地址： | 510316 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开一种高效提取甘蔗糖制品DNA的试剂盒和方法。该试剂盒包括预处理液、裂解液、DNA沉淀液、结合液、磁珠悬浮液、漂洗液和洗脱液。本发明的方法是先将甘蔗糖制品和预处理液混匀，处理后离心，收集沉淀；沉淀经裂解、去蛋白和DNA沉淀获得初步提取的DNA，用水溶解DNA；加入结合液和磁珠悬浮液，分离磁珠，磁珠再经过两次漂洗和洗脱获得纯化的DNA。本发明提供的试剂盒和方法提取获得的甘蔗糖制品DNA含量和纯度较高、且提取过程中不使用酚、氯仿等有毒试剂，对环境和实验人员不会造成危害。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 高效 提取 甘蔗 制品 dna 试剂盒 方法 | ||
【主权项】：
一种高效提取甘蔗糖制品DNA的试剂盒，其特征在于包括：预处理液、裂解液、DNA沉淀液、结合液、磁珠悬浮液；其中，预处理液为10％～20％(w/v)的PEG8000、25％～50％(v/v)异丙醇、或10％(w/v)的PEG8000加25％(v/v)体积异丙醇形成的混合液；裂解液的组成如下：300～800mM NaCl、30～80mM Tris‑HCl、30～80mMEDTA、2～4％(w/v)SDS，2～3％(w/v)PVPP或PVP，pH 8.0，溶剂为水；DNA沉淀液为10％～30％(w/v)的PEG8000；结合液的组成如下：10％～15％(w/v)的PEG8000、2～6M GITC、30～60mM NaCl、30～60mM Tris‑HCl，pH6.4，溶剂为水。
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