[发明专利]一种人原代肿瘤细胞的分离制备方法有效
| 申请号： | 201710661279.1 | 申请日： | 2017-08-04 |
| 公开（公告）号： | CN107254446A | 公开（公告）日： | 2017-10-17 |
| 发明（设计）人： | 李霞云;潘新;贺伟;刘世红;卢家堃 | 申请（专利权）人： | 北京世纪劲得生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/09 | 分类号： | C12N5/09;A01N1/02 |
| 代理公司： | 北京爱普纳杰专利代理事务所(特殊普通合伙)11419 | 代理人： | 王玉松 |
| 地址： | 101200 北京市平*** | 国省代码： | 北京;11 |
| 权利要求书： | 暂无信息 | 说明书： | 暂无信息 |
| 摘要： | 本发明提供了一种人原代肿瘤细胞的分离制备方法，将培养过程分为两个阶段，并分别使用含有不同浓度的胎牛血清的培养基进行培养，通过逐渐提高培养基中胎牛血清的浓度，以使原代细胞的适应性逐渐增强、活力逐渐提高，细胞增殖较快、得率较高，同时遗传稳定性良好；在培养基中添加丙酮酸钠、柑浓素、Y‑27632以及灰黄霉素，可以防止细菌和真菌感染，并能促进细胞增殖、抑制细胞分化；在冻存液中添加植物源重组人血清白蛋白，可以部分代替胎牛血清，降低胎牛血清的用量，从而在保证效力不变的情况下降低成本。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 人原代 肿瘤 细胞 分离 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种人原代肿瘤细胞的分离制备方法，其特征在于，包括如下步骤：S1：原代肿瘤细胞的分离：采集肿瘤组织，清洗干净，去除坏死组织和结缔组织，并切割成组织碎块；S2：第一培养阶段：将所述组织碎块接种于细胞培养瓶中，加入1～5mL的含低浓度胎牛血清的RPMI‑1640培养基，培养2～3周；S3：第二培养阶段：更换含有高浓度胎牛血清的RPMI‑1640培养基，继续培养至细胞融合度达到70～80％；S4：细胞收获及冻存：将得到的细胞进行消化收获，向收获的细胞中加入冻存液，并进行冻存。
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